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8 食品与药品 Food and Drug 2008年第10卷第11期
重组超氧化物歧化酶 1/3杂合酶在大肠杆菌中表达的优化
*
宋筱龄，范立强 ，容智凤，赵 健，李素霞，袁勤生
（华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237）
摘 要：目的 获取活性高的重组SOD 1/3杂合酶。方法 用含pET-SOD 1/3的工程菌诱导表达重组SOD 1/3杂合
2+ 2+
酶，通过分析SDS及SOD酶活性，考察诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、Cu、Zn浓度对重组酶表达
量和活性的影响。结果 正交试验表明，用1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 （IPTG）在A =1.2时诱导，
600
2+ 2+
Cu、Zn浓度分别为2.4 mmol/L，诱导温度15℃，诱导时间12 ，h能获得高活性重组SOD 1/3，其比活性
2+ 2+
为1 681 U/mg。结论 培养温度和Cu、Zn浓度是优化表达的最主要因素。降低诱导温度有利于重组酶的可溶
2+ 2+
性表达，添加Cu、Zn 能促进重组酶活性提高。
关键词：超氧化物歧化酶；杂合酶；表达；优化
中图分类号：Q554 文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2008)11-0008-04
E. coli
* *
SONG Xiao-ling, FAN Li-qiang, RONG Zhi-feng, ZHAO Jian
(
200237,China)
Abstract：Objective E. coli. MethodsThe
2+ 2+
or Zn
2+ 2+
assay. Results ℃ or Zn and 1
mmol/L IPTG atA
600
Conclusion 2+
2+
or Zn
2+ 2+
Cu or Zn can increase the activity of hybrid enzyme SOD1/3.
Key words：
超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase， 但它在原核和酵母系统中的表达效果不理想[3-5]
，不
·-
SOD）是催化超氧阴离子 （O2 ）歧化反应的金 能大量制备。为此我们构建了表达含有SOD1和
属酶。人体内SOD有3种：细胞内Cu, ZnSOD
SOD3 C端肽编码序列的杂合酶的工程菌。本研究以
（SOD1）、线粒体中MnSOD（SOD2）和胞外Cu,此重组菌为材料，考察了诱导剂、诱导表达时间、
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