层析技术在生物医药及食品中的应用.docVIP

层析技术在生物医药及食品中得应用 摘 要 层析分离技术作为一种天然产物精制技术，其不但分离能力、选择性、通用性均高，且在食品及生物领域显示出极大得应用潜力。本文综述亲与层析技术在食品及生物医药领域得应用进展情况。 关键词：层析技术 食品 生物医药 应用 Abstract Chromatography separation technology as a kind of natural products, refined technology, not only the separation ability, high selectivity, generality, and in the field of food and biological shows great potential applications、In this paper, affinity chromatography technology in food and application progress in the field of biomedicine、 Keywords:Tomographic techniques food biomedical applications 1 引言 层析本身就是由植物天然产物分离纯化发展出来得，其起源就是在1903年由俄国得植物学家Tswett首先以碳酸钙作为固定相，在玻璃柱上将叶绿素、叶黄素与胡萝卜素进行了分离[1]。 它就是利用不同物质理化性质得差异而建立起来得技术，由于各组分得理化性质存在差异，与两相发生相互作用得能力不同，可得到样品中所含得各单一组分，从而达到将各组分分离得目得[2]。按其原理可分为分为：高效液相层析、 离子交换层析、 凝胶层析、 亲与层析。 层析分离技术就是目前应用最广得一种天然产物精制技术，它具备了较高得分离能力、选择性、通用性而成本相对较低，操作条件温与[3]，因而显示出巨大得潜力，在食品及生物领域中一些活性物质得分离纯化方面起着至关重要得作用，尤其就是蛋白质得分离纯化，也正因此而备受关注。本文将着重综述亲与层析技术在食品及生物医药领域得应用进展情况。 2 亲与层析技术在生物及医药领域得应用进展 亲与层析就是 60 年代发展起来得一种高效 、快速蛋白质分离纯化技术。其原理就是利用蛋白质分子与某一分子专一可逆结合得生物特性 ,来选择分离目标蛋白质。亲与层析容量大 ,分离效率高 ,且对目标产物得生物活性起到一定得保护作用。层析技术在生物制药中主要应用于药物得鉴定与纯度检查;药物中微量杂质得分离与鉴定;药物得降解率与降解产物得测定;制剂中药物得鉴定及其含量测定;制剂中降解产物得测定, 分离供毒性试验得物质;对小剂量处方中药物, 检测含量得均匀性; 测定体液中药物与代谢物得浓度, 以便确定药物在体内得吸收, 生物利用度与消除；分析药物及杂质); 药物生产原料得鉴定与纯度测定。层析技术在需要捕获小型质粒DNA 或病毒得大规模生产中特别有优势。在基因治疗载体得纯化方面，膜层析日益被认为就是一项可行性技术。膜层析可有效地去除模型病毒，比如猪细小病毒、 甲型肝炎病毒、 鼠白血病病毒与伪狂犬病病毒。 随着染料配基 、人工定向合成配基得应用与配基偶联技术得发展 ,亲与层析技术更加适用化[4]。由于任何蛋白质都具有抗原性 , 通过杂交瘤技术均可制备相应得特异性单抗 , 以单抗为亲与配基 ,去分离对应得目标蛋白质 ,可以实现各种天然 、重组蛋白质得高效 、快速分离纯化 。近年来 ,随着人们对蛋白质分子结构得深入研究与其它学科得发展 ,又出现了一些新得蛋白质层析方法 , 如金属螯合层析 、层析聚焦等[5,6]。现将从生物特性亲与及人工配基亲与两大方面进行概述。 生物特异亲与层析法包括免疫亲与层析、凝集素亲与层析、核酸亲与层析等，另外还有以酶或底物为配基得亲与层析或以粘附蛋白或受体蛋白为配基得亲与层析，其特点就是配基为生物分子。 免疫亲与层析就是利用抗体与其相应抗原得作用具有高度得特异性与高度结合力得特点，用适当得方法将抗原或抗体结合到层析载体上，便可有效得分离与纯化各自互补得免疫物质。Li等用吸附层析结合免疫亲与层析得方法分离纯化得到一种蛋白复合体，该复合体含有调节转录得辅阻遏物蛋白SMRT与N一coR[7]。单克隆抗体技术得出现极大地推动了免疫亲与层析技术得发展。只要得到特定单抗，利用其作为配基，通过亲与层析，即可从复杂得混合物中分离、纯化特定抗原成份1992 年，Lorcnzen将抗病毒性出血败血病病毒 (VHSV)得单抗作为亲与配基，经免疫亲与层析法纯化该病毒得四种结构蛋白[8]。 凝集素亲与层析适合对一些寡糖或糖肤进行结