常用培养基的配方.docxVIP

伊红美蓝培养基 原理 一般用来 鉴定大肠杆菌。 伊红为酸 性染料，美蓝为碱性染料。 当大肠杆 菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷 被染成红色， 再与美蓝 结合形成紫黑色 菌落，并带有 绿色金属光泽。 在碱性环 境中不分解乳糖产酸的细菌不着 色，伊红和美蓝不能结合 ，故沙门氏菌 等为无色或琥 珀色半透明菌落。金葡菌在此培 养基上不生长。 常用的伊 红美蓝乳糖培养基， 可 用来鉴别饮用水和乳制品中是否 存在大肠杆菌等 细菌。如果 有大肠杆菌，因其强烈分 解乳糖而产生大量的混合酸 ，菌体带 H+，故菌落 被染成深紫色 ，从菌落表面的反射光中还可以 看到金属光泽。 用伊 红美蓝培养基鉴定 水中大肠杆菌 步骤如下 ： ①制作伊 红美蓝培养基，趁热注入培养皿 中，凝成平板，待用。 ②用灭过 菌的锥形瓶盛取河水或沟水，按 1： 10 稀释。 ③取 0.1 毫升稀释液接种于伊红美蓝培养 基上。用平板划线分离法进行 分离。 ④将划线 后的培养皿倒置 37℃温箱中培养 18～ 24 小时。培养基 中会出现大肠杆 菌菌落，菌落 中心呈暗蓝黑色，发金属光泽。 ⑤将菌落 接种于斜面培养基上（由营养琼 脂培养基制成）。 配置方 法 蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二 钾 2g 琼脂 20~30g 蒸馏水 1000ml 2%伊红水 溶液 20ml 0.5 % 美蓝水溶液13ml 储备培养 基的制备 先将琼脂 加至 900ml 蒸馏水，加热溶解，然后加入磷酸 氢二钾及蛋白胨，混匀使 之溶解，再以蒸馏水补 足至 1000ml ，调整 PH为 7.2~7.4 。趁热用脱脂棉或绒布过滤 ， 再加入乳糖， 混匀后定量分装于烧瓶内，置高 压蒸汽灭菌器内以 115℃灭菌 20min ， 贮存于冷暗处 备用。 制法 将蛋白胨、磷  酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正  PH， 分装于烧瓶内，  121℃高压 灭菌 15min 溶液，摇匀，  备 用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至 倾注平板。  50～55℃，加入伊红和美蓝 麦康凯培养基 原理 1.全称麦康凯琼脂或是麦康凯 培养基 2.一种用于分离鉴定 细菌 的培养基， 大肠 杆菌在其上呈红色或 粉红色 ，有的菌落只是中间 呈 现红色。 配置方法 蛋白胨 17g 脙胨 3g 猪胆盐 (或牛、羊胆盐 ) 5g 氯化钠 5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000mL 乳糖 10g 0.01%结晶紫水溶液 10mL 0.5% 中性红水 溶液 5mL 麦康凯 -制法 1 将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶解于 400mL 蒸馏水 中，校正 pH7.2 。将琼脂加入 600mL 加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内， 121℃ 高压灭菌 15min 备用。 2 临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，冷至 50～ 55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液， 摇匀后 倾注平板。 注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。 吲哚试验 吲哚（ indol ）试验 有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质） ，经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色，是为吲哚试验阳性。 LB 培养基 配方 胰化蛋白胨 1g 酵母 提取物 0.5g LB 培养基 -LB 培养基条件 LB 培养基 -固态培养基 LB 固体培养基 1L 和液体一样，加  NaCl 1g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 15g 琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗生素，并且 倒好板。 LB  固体培养基倒板 1.配制：  100mlLB  培养基加入  1.5g  琼脂粉 2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的 LB 固体培养基置与 55℃的水浴中，待培养基温 度降到 55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。 3.倒板：一般 10ml 倒 1 个板子。 培养基倒入培养皿后， 打开盖子， 在紫外下照 10-15 分钟。 4.保存：用封口胶封边，并倒置放于 4℃保存，一个月内使用。 牛肉膏蛋白胨培养基（营养琼脂） 配方 蛋白胨 10g；牛肉膏 3g ；氯化钠 5g；琼脂 15～ 20g；蒸馏水 1000mL ； 制法 将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入 15%氢氧化钠溶液约 2mL ，校正 pH 至 7.2～ 7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶， 121℃高压灭菌 15min。 注：此培养基可供一般细菌培养之用， 可倾注平板或制成斜面。 如用于菌落计数， 琼脂量为 1.5% ；如作成平板或斜面，则应为 2%。 甲基红试验 甲基红试验 -化学属性 甲基红（ Methyl Red ）试验 肠杆菌科各菌属都