细胞质基质与内膜系统课件.pptVIP

another 30 min - 1 hr : Plasma Membrane labeled and some radio labeled proteins found in the extracellular space Palades original data Proteins were localized to i) rER ii) Golgi iii) Secretory vesicles ER Golgi Secretory Vesicles cell exterior ? de Duve ， G.Palade ，分离到了但八只合成和分 泌功能的结构。 ? 细胞被破碎，膜碎片形成小囊泡， ? 小囊泡来自于不同的膜结合细胞器 ( 细胞核、线 粒体、质膜、内质网等 ) ? 来自于内膜系统的小囊泡称微粒体（ microsome) ? 差速离心分离与功能分析 微粒体 (microsomes) 分离 微粒体的功能研究 微粒体：保留了膜的结构特征 , 活细胞中的生物活性和功能 如：高尔基体的囊泡： 1 ）将蛋白质和脂进行糖基化修饰的作用 2 ）分离的特殊蛋白作为抗原制备抗体 , 3 ）制备的抗体与特定的颗粒如金颗粒结合 , 4 ）通过免疫电镜技术就能够对用作抗原的酶进行定位 , 5 ）揭示了高尔基体在复杂的糖装配中的具体过程。 ? 用酵母突变体研究分泌过程及与分泌相关的基 因揭示了小泡运输过程。 ? 用突变体研究内膜系统的运输作用 ? Mutagenize cells and allow to grow at pe rmissive temp. (24 o C). ? Shift cells to 37 o C (non-permissive tem p.) for several hours. ? Separate cells by density gradient centr fugation ? Plate the dense cells at 24 o C. ? Screen individual colonies for defects in secretion *permissive vs nonpermissive temperature ? sec 突变体的 5 种不同种类 sec4-2 25 o C sec15-1 after 2 hr @ 37 o C Wild type morphology Accumulation of vesicles 野生型是分泌正常的酵母 ,A 、 B 、 C 、 D 、 E 是五类不同的 sec 基因 (secretory genes) 突变 , 代表了蛋白质分泌的五个过程。 A: 分泌蛋白不能进入内质网 ,B: 内 质网出芽缺陷 ,C: 分泌小泡不能与高尔基体融合 :D: 高尔基体不能形成分泌泡 ;E: 分泌泡不能与质膜融合。 膜结合细胞器与内膜系统 ● 膜结合细胞器 (membrane-bound organelles) 或膜结 合区室 (membrane-bound compartments) ● 细胞质膜系统 (cytoplasmic membrane system) ● 内膜系统 (endomembrane systems) 膜结合细胞器的种类和功能 真核细胞膜结合区室的主要功能 细胞器 ( 区室 ) 主要功能 胞质溶胶 代谢的主要场所；蛋白质合成部位 细胞核 基因组存在场所， DNA 和 RNA 的合成地 内质网 大多数脂的合成场所，蛋白质合成和集散地 高尔基体 蛋白质和脂的修饰、分选和包装 溶酶体 细胞内的降解作用 内体 内吞物质的分选 线粒体 通过氧化磷酸化合成 ATP 叶绿体 进行光合作用 过氧化物酶体 毒性分子的氧化 膜结合细胞器在细胞内的分布 第七章 细胞质基质与细胞内膜系统 第一节 细胞质基质的涵义与功能 一、细胞基质的涵义 二、细胞基质的功能 第二节 细胞内膜系统及其功能 一、内质网的形态结构与功能 二、高尔基体的形态与功能 三、溶酶体的形态与功能 第三节 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输 一、信号假说与蛋白质