第二章：染色体与DNA-1上课讲义.pptVIP

第二章：染色体与DNA－1;一、DNA的一级结构;;A G T C;;;;;;DNA分子的大小 分子量 碱基对（base pairs，bp） 三种表示方法 长度 三者的关系 分子量＝bp×660 D 每圈螺旋10.5bp ＝ 3.4nm 测量的方法：凝胶电泳、电镜金属投影 ;DNA分子的多样性;二、DNA的物理图谱;单酶切 XbaI PstI PstI XbaI 双酶切 XbaI PstI PstI XbaI ; PstI XbaI PxtI+XbaI 1400bp 1200bp 900bp 900bp 750bp 600bp 500bp 500bp 300bp 150bp 150bp; 2450bp 750bp P 500bp P 1200bp 150bp 600bp 500bp 300bp x x 150bp 1400 900bp;三、DNA一级结构的测定;;;;;分成4组，每一组反应体系中加入4种dNTP和一种相应的ddNTP，反应后可得到不同长度的以双脱氧结尾的DNA片段，各DNA片段均只相差一个核苷酸长度，各组的片段经凝胶电泳分离后，每一片段的电泳位置不同，从下而上可直接读出DNA序列。;Sanger法测定DNA序列的原理图示;聚丙烯酰胺凝胶电泳;;;四、DNA的双螺旋结构;;;;B-formDNA;;;;; Left-handed Z-DNA;五、DNA的三股螺旋结构;DNA三股螺旋结构;;六、DNA超螺旋结构; 环状DNA分子常以超螺旋结构存在，并以负超螺旋为主，有利于转录的起始。 ;;七、核小体与染色体;;;;;;;;;;八、DNA结构的不均一性;反向重复序列（inverted repeats) 其中每条单链以5／－3／方向都是相同的。 5／ GGT……ACC 3／ 3／ CCA……TGG 5／ 易形成发夹结构（hairpin)或十字形结构 限制性酶切位点 ;;;富含A/T的序列 易于解链，转录和复制的起始位点。 富含G/C的序列 难于解链，稳定区域。 高度重复??列 经常是短的序列高度的重复 ;碱基排列顺序对螺旋结构的影响 嘌呤和嘧啶的排列顺序不同双螺旋的稳定性有显著的差异 5／GC 3／ 5／CG 3／ 3／CG 5／ 3／GC 5／ 前者的稳定性大于后者 从嘌呤到嘧啶方向的碱基堆集力高于后者;九、DNA的变性、复性和分子杂交;;;2、DNA的复性 DNA回复成双链结构，称为复性（renaturation） 热变性经冷却后即可复性，称为退火(annealing) ;3、 C值与C值矛盾（C-value paradox) C值:是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。 C值矛盾:基因组大小与遗传复杂性并非是线性关系，称为~。如两栖