细菌性食源性疾病及其病原学检验规程课件.pptVIP

概况 ? 1885 年德国人艾希自人畜肠腔分离出（ E.coli ），人 类认识该菌为正常细菌 ? 1945 年 Bary 自病儿腹泻便中大量检出 E.coli ，并证实 该 E.coli 是病源 ? 逐渐认识 E.coli 有两类：正常 E.coli 和致泻 E.coli ? EIEC 、 EPEC 、 ETEC ? 1982 年美国发现有种 E.coli 引起出血性肠炎（ HC ）和 溶血性尿毒综合征（ HUS ） ? 1987 年 levine 提出 EHEC 概念，指出 SLT 毒素是病因 ? 1996 年日本 9000 名儿童暴发， 11 人死亡， E.coli O157 ： H7 ? 1999 年我国暴发？ 大肠杆菌 0157 : H7 检测 ? 大肠杆菌 O 、 H 抗原不同分成 200 多血清型 ? 山梨醇 不发酵 （ 95% E.coli 发酵 ） ? 葡萄糖醛酸酶 阴性 （ 96% E.coli 阳性 ） ? 判断为肠出血性大肠杆菌（ EHEC ），除血清 型符合 0157 : H7 或 H- 外，还须证实 SLT （ VT ） 阳性 初筛试验 ? 克氏双糖 / 三糖铁 / 肠道综合发酵管 1 、管 2 ? PCR ? VIDAS 可疑菌的鉴定 ? 全面生化试验 （ API 、 ATB 、 VETIK 、 IDS 、 SWF 、手工鉴定 等 ） ? 噬菌体试验 ? 血清分型 ? 毒素或毒素基因测试 毒素或毒素基因测试 ? 霍乱弧菌肠毒素、葡萄球菌肠毒素、 EIEC 侵袭毒素、 ETEC 肠毒素按国标方法进行动 物试验或酶联免疫试验（ VIDAS 等） ? 毒素基因测试 ：霍乱弧菌肠毒素、葡萄球 菌肠毒素、致泻性大肠埃希菌的所有毒力 基因均可用 PCR 检测，特别是对致泻性大 肠埃希菌的定论应以毒素或毒素基因为准 患者血清的试验 ? 疑似伤寒或副伤寒的患者应取发病一 周的血清做肥达氏反应，用作辅助诊 断 ? 将患者急性期和恢复期的血清做凝集 效价的对比， 4 倍增长可确诊 细菌性食源性疾病食品、水 样、环节样品检验常规程序 （附图 3 ） 细菌性食源性疾病食品、水 样、环节样品检验推荐程序 （附图 4 ） 细菌性食源性疾病人粪便、 肛拭、呕吐物、咽拭样品检 验推荐程序 （附图 5 ） 检验结果的判定 ? 应以找到病原体或其毒素为 最终结论 ， 在此之前所有的快速检验方法如 PCR 、 VIDAS 等得到的结果 仅供参考 ? 应注意非病源检样与病源检样检出的 病原体的 统一性 检验结果的判定原则（ 1 ） ? 非病源检样与病源检样检出的 致病意 义明确 的细菌在种类、生化和 / 或血清 型、毒素型 均一致 时，可报告为细菌 性食源性疾病事件的 病原体 检验结果的判定原则（ 2 ） ? 非病源检样与病源检样 只有一种检出 病原 菌时，此检验结果仅供临床与流行病学诊 断参考，其中非病源检样的检验结果参考 价值较大，病源检样只有在同次细菌性食 源性疾病事件中的多数患者样品中检出种 类、生化和 / 或血清型、毒素型均一致的病 原体时才有 参考价值 检验结果的判定原则（ 3 ） ? 非病源检样与病源检样 只有一种检出 病原 菌时，在与同一次细菌性食源性疾病事件 中采集的多数患者的急性发病期和恢复期 血清发生有凝集 效价显著升高 的，可报告 为细菌性食源性疾病事件的病原体，但此 结果仅用作 回顾性诊断 检验结果的判定原则（ 4 ） ? 非病源检样与病源检样检出占 绝对优势 但 通常 致病意义不甚明确 的细菌如大肠艾希 菌、溶藻弧菌等，且其在种类、生化和 / 或 血清型均一致，同时本次细菌性食源性疾 病事件中非患者对照标本中未检出该菌时， 应做该菌的毒素、毒素基因或动物试验， 阳性结果可报告为细菌性食源性疾病事件 的 病原体 检验结果的判定原则（ 5 ） ? 样品中检出的生化、血清符合致泻性 大肠艾希菌、金黄色葡萄球菌 ，一定 要以 毒素、毒素基因测试阳性 为最终 结论报告 ? 蜡样芽胞杆菌 在非病源检样中须达到 10 5 cfu/g(ml) 以上者才有报告价值 检验结果报告 ? 检验技术人员应在收到食源性细菌性突发 事件采样送检申请单后立即进行样品检验， 并在 5 日内 出具检验结果报告。特殊情况需 延长出具检验报告时限的，应报相应卫生 行政部门批准 ? 一旦检验结果确定后，在检验报告还未完 成前可先向有关部门 电话报告 检验结果 ? 检验报告送达单位