第四章 病毒遗传分析.pptVIP

第三章 病毒的遗传分析 学习要点: 1??噬菌体的突变型及基因重组的特点； 2 噬菌体的互补测验与顺反子测定； 3 用两点测交与三点测交测定噬菌体交换值; 4 ?噬菌体基因组结构特点； 5 原噬菌体对细菌基因重组的影响(合子诱导）; 6 噬菌体的线状染色体与环状连锁图。 Background 一、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 ①繁殖世代所需时间短； ②易于管理和进行化学分析； ③遗传物质较简单，便于用作研究基因结构、功能及调控机制的材料。 ④便于研究基因的突变； ⑤便于研究基因的作用； ⑥可作为研究高等生物的简单模型； 二、细菌和病毒的拟有性过程 细菌和病毒均属于原核生物不存在严格意义上的有性过程。 细菌细胞内除了染色体外还有核外DNA物质结构(如噬菌体和质粒)，它们可以在细胞间传递，并且形成细菌染色体间以及细菌染色体与核外遗传因子间的重组体，类似于真核生物减数分裂过程中形成的重组体结构。 拟有性过程 引起细菌、病毒间遗传物质转移与重组的过程。 拟有性过程的存在是细菌、病毒作为真核生物的模型研究遗传重组和基因结构的重要前提。 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 噬菌体的繁殖 （一）烈性噬菌体的感染周期 遗传学上应用最广泛的烈性噬菌体是大肠杆菌（ E.coli ）的T噬菌体。它们的结构大同小异，外貌一般呈蝌蚪状。T偶列和T奇列有些不同，以T 4的结构最为典型. （二）温和性噬菌体的感染周期 温和性噬菌体具有溶原性（lisogeny）的生活周期。这类噬菌体侵入细菌以后，细菌细胞并不马上裂解。 温和性噬菌体有两种类型。 （1）以λ为代表 （2）P 1 噬菌体 裂解周期： 溶源性细菌?自发或经诱发?裂解细菌 ↓释放 子噬菌体。 T4病毒粒子含有线形双链DNA，基因组长度166kb(千碱基对)；?其基因组DNA含5-羟甲基胞嘧啶以代替胞嘧啶，而且羟甲基是葡糖化了的。 T4?DNA聚合酶是在生物中发现直接参与DNA复制的第一种酶。 二、遗传图谱 三、研究方法 1、噬菌斑 2.一步生长曲线试验 3. 单菌释放实验 四 噬菌体的突变型 (一)快速溶菌突变型（r）: 噬菌斑大于野生性并且边缘更为清晰，突变率为10-4～10-3。 正常噬菌体，r+，产生的菌斑小而边缘模糊 突变噬菌体，r -，产生的菌斑大两倍而边缘清晰 (二)宿主范围突变型（h）：突变率为10-6，不同的菌株中突变性不一样。 (三) 条件致死突变型 1 温度敏感突变型 2 抑制因子敏感突变（sus） 噬菌体 细菌 正常基因 sus+ su- 突变基因 sus su+ 表5-2携带不同专一性抑制基因宿主中sus突变噬菌体的表现 （二）无义突变与无义抑制突变 无义突变：指一个为氨基酸编码的密码变为终止密码的突变。 无义抑制突变：指能抑制无义突变表现的突变。 第二节 噬菌体突变型的互补试验 一?X174条件致死突变型的互补测验 (一) ?X174 DNA结构复制 图5-1 (二) ?X174的突变型与互补测验 1 互补测验原理 在限制条件下，能长出噬菌斑： 说明：两个突变型能发生功能互补，是两个基因。 在限制条件下，不能长出噬菌斑： 说明：两个突变型不能发生功能互补，是同一基因。 2 互补测验及结果 P124 表5-4 ?X174突变的互补测验结果 顺反子 突 变 型 A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28, B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11, C och6 D am10,amH81, E am3,am6,am27, F am87,am88,am89, amH57,op6, op9,tsh6,ts41D G am9,am32,ts,ts79 H amN1,am23,am80,am90,ts4 二 T4突变型的互补试验 第三节 噬菌体突变的重组试验 一 T2突变型及特性 细 菌 Ｂ B/2 快速溶菌突变型：r 大噬菌斑； 野生型：r+ 小噬菌斑； T2宿主范围野生型: h + - 半透