第十章 细菌和病毒的遗传分析(二).pptVIP

二、接合 典型的细菌杂交实验的证明：细菌也能进行杂交，进行遗传物质交换。 1、1946 Lederberg和Tatum选用大肠杆菌的两个不同菌株杂交： A菌株：met-bio- thr+leu+thi+ ，蛋氨酸和生物素缺陷型 B菌株：met+bio+thr-leu-thi- ，苏氨酸和亮氨酸硫胺素缺陷型 混合培养A和B菌株 涂布在基本培养基上 原养型（ met+bio+thr+leu+thi）菌落。 A品系：met－ bio－ thi＋ leu＋ thr＋（thi：硫胺素B1） B品系：met＋ bio＋ thi－ leu－ thr－ A A+B B 基本培 养基 met ＋ bio ＋ thi＋ leu＋ thr＋ U型管实验 3、1953年海斯（W.Hayes）做了一个杂交实验：链霉素处理的菌株不分裂（不杀死）。 ★实验1：A菌株（链霉素处理）×B菌株 （可分裂） 基本培养基 ↓ 出现菌落（B形成的菌落） ★实验2： B菌株（链霉素处理）×A菌株 ↓ 基本培养基 ↓ 未出现菌落（A未形成菌落） 中断杂交后，接合后体中各个性状出现的频率 根据中断杂交试验绘制的连锁图 用中断杂交试验确定的几个Hfr菌株的基因顺序 (2) 重组作图 细菌的重组作图的前提 (1)?两个基因紧密连锁 (2) 两个基因进入受体菌的先后顺序 例：已知lac和ade紧密连锁,在HfrX品系lac+比ade+先进入Ｆ- HfrX lac+ade+strs × F- lac-ade-strr 选择培养基 ? 加str且lac，无ade  Ｆ- ade+strr (lac-或lac+) 计算重组值 重组值=重组菌落数/总菌落数 × 100% =(lac- ade+)/[(lac+ ade+ )+(lac- ade+)]×100% = 15/(52+15) × 100% ≈ 20% 已知中断杂交实验该两个基因相距1分钟, 重组作图与中断杂交作图的图距关系: 1分钟图距 ≈ 20% 重组值 E.coli染色体全长： 90分钟；含有：4.2×106bp 20 × 90 ≈ 1800 cM 大肠杆菌染色体图 2 普遍性转导：起因是噬菌体的错误包装 伊红美兰培养基 紫红色菌落ade+lac+ 粉红色菌落ade+lac- lac+ ade+ lac- ade+ F- lac+ ade+ 亲组合 52 ?F- lac- ade+ 重组合 15 三 F`因子与性导 1. F`因子与F`菌株 F`因子：指整合态的F因子从Hfr上异常切割下来，携带了细菌个别基因的缺陷型F因子，但是F`因子仍然可自主复制。F`菌株：指带有F`因子的细菌。 lac+ F′菌株 F- lac- lac+ lac- lac+ lac- F ′因子 部分二倍体 A F` × B F- → A F`, B F`(部分二倍体) A F+ × B F- → A F+, B F+ (不导入供体菌基因) A Hfr × B F- →A Hfr，B F- 2 性导: 指利用Ｆ′因子将供体菌的基因导入受体菌形成部分二倍体的过程 F+、F’、Hfr三者之间的关系可以表示为 性导的特点: （1）只能转移Ｆ因子插入位点附近的基因 （2） F`因子可自主复制 （3）形成部分二倍体，确定部分二倍体中两基因的显隐关系 (4) 利用两基因的“共性导率作图” 四、转导（transduction） 1. 定义：以噬菌体为媒介所进行的细菌遗传物质重组的过程，称转导。 转导分为两类：局限性转导和普遍性转导。 普遍性转导：可以转导细菌染色体组的任何不同部分 局限性转导：由温和噬菌体进行的转导，只能转移细菌特定部分的基因，因此叫做局限性转导 Lederbery及其学生Zinder（1951）首先在鼠伤寒沙门氏菌（Salmenella typhimurium）中发现转导现象。 U型管试验