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实验五、动物组织 一、目的与内容 (一)目的 1 .了解动物的四类基本组织的结构特点,理解组 织结构与机能的密切关系; 2 .掌握血液涂片的方法。 (二)内容 1 、上皮组织的观察:单层扁平上皮装片,小肠横 切,纤毛上皮装片等; 2 、肌肉组织的观察:平滑肌装片,骨骼肌横切, 心肌切片等; 3 、结缔组织的观察:疏松结缔组织装片,腱纵切, 透明软骨等,自制人或蛙血液涂片等; 4 、神经组织的观察:脊髓横切,运动神经元装片 等。 二、材料与用品 ( 一 ) 材料 蟾蜍,动物各组织的玻片标本 [ 一般用苏木精一 曙红 ( 也称伊红 ) 染色,简称 H · E 染色 ] 。 ( 二 ) 用品 1 .器具 显微镜,解剖器具,蜡盘,载玻片,盖玻片, 烧杯,染色缸,玻片架,蛙钉,采血针、棉花等。 2 .试剂 0 . 65 %生理盐水,甘油,香柏油,甲醇,吉姆 萨染液或瑞氏染液,蒸馏水,乙醚、等。 三、操作与观察 (一)血液涂片的制备与观察 (1) 人或蛙血涂片标本的制备 ①取血:左手从蛙背面握蛙,右手持注射器从蛙 胸部进针刺入蛙心脏采血。滴 1 滴在洁净载玻 片右端,注意血滴不宜过大。(或者从人的左 手无名指指端内侧取血。) ②涂片:另取边缘光滑的 1 块载玻片作推片斜置 于第 1 块载玻片上血滴的左缘,成 40 。 左右角 度。将推片稍向右移,接触血滴,使血液充满 两玻片之间的夹角。再将推片向左方匀速推进, 使玻片上留下薄而均匀的血膜。 左右摇动涂 有血膜的玻片,使之尽快干燥,避免细 胞皱缩。 ③染色:晾干后,用瑞特氏染液数滴加于 涂片上固定染色 1 min ,在染液的上面 再加蒸馏水再染 3min, 然后在染色玻片 的一端用自来水细流缓缓冲去染液( 在稀 醋酸液中蘸数下 ),斜立血涂片于玻片架 上,晾干后置显微镜下观察。 注意事项: 第一 . 滴加瑞氏染液的量不宜太少 , 太少易挥发 变干 , 形成颗粒。 1 张血片 , 一般可滴加 2 ~ 3 滴染液。 第二 . 冲洗时应将蒸馏水直接向血膜上倾倒 , 使 液体自血片边缘溢出 , 沉淀物从液面浮去。切勿 先将 染液倾去再冲洗 , 否则沉淀物附着于血膜上不易 冲掉。 蛙血涂片观察:在低倍镜下选择分布均匀的血细胞, 换高倍镜观察。蛙红细胞呈椭圆形,中央有一椭圆形 细胞核,呈蓝色,细胞质呈红色。此外还可见到白细 胞和凝血细胞。 人的血涂片观察:红细胞数量最多,小而圆,无细 胞核,其中央部分着色较周围淡;慢慢移动标本,可 观察到各种白细胞,白细胞数量比红细胞少,但胞体 大,细胞核明显,极易与红细胞区别开。血小板为形 状不规则的细胞小体,其周围部分为浅蓝色,中央有 细小的紫色颗粒,常聚集成群,分布于红细胞之间。 高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒,在油镜下才 能看到颗粒周围的浅蓝色胞质部分。 (2) 蛙血涂片的观察 分类:单层上皮和复层上皮 功能 : 保护、感觉、分泌和吸收。 特征: ( 1 )上皮细胞主要为柱状、扁平状。 ( 2 )排列紧密,有单层和多层之分。 ( 3 )细胞间紧密连接,间质少。 ( 4 )基部分泌一层很薄的基膜。 1. 上皮组织 ( 二 ) 观察各组织制片 低倍镜观察,可看到许多大小不等的、圆形或椭圆 形的红色甲状腺滤泡。高倍镜观察,滤泡壁由 1 层 立方体形上皮细胞构成,核圆形、蓝紫色,位于 细胞中央,细胞质粉红色。 (1) 单层立方上皮 ( 图 3 — 3)( 兔甲状腺切片 ) (2) 单层柱状上皮 ( 图 3 — 4)( 猫小肠横切片 ) 低倍镜观察,可见黏膜面形成许多指状突起,突向管腔,突起 表面覆有 1 层柱状上皮。 单层柱状上 皮 ( 胃、肠黏膜 ) 高倍镜观察,可见上皮细胞为柱状,核长椭圆形、蓝紫色,靠近细胞的基底部。把 虹彩光圈缩小,减少光量,可见细胞的游离面有 1 层较亮的粉红色膜状结构,称为 纹状缘。在柱状细胞之间散在有杯状细胞,此细胞上端膨大、下端细小,核呈三角 形或半圆形,位于细胞基底部。在杯状细胞上端的细胞质内积有大量不着色的黏液, 在切片上呈卵形空泡状结构,细胞游离面无纹状缘。 (3) 假复层纤毛柱状上皮(兔气管横切片 ) 气管壁内表面即黏膜层由假复层纤毛柱状上皮组成。 肉眼辨别切片中朝向气管腔的黏膜层,并置于视野 中央。 低倍镜观察,管
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