管碟法(牛津杯法)的注意事项.pdfVIP

精品文档 (1) 对于一般的抗生素测定来说 , 大多数情况下都需要把牛津杯加满 , 但作者在实际测 定中发现 , 若加满牛津杯 , 培养 24 h 后牛津杯内仍有将近一半的残留溶液。 (2) 管碟法测定 Nisin 效价时 , 控制检测平板中菌悬液的浓度非常重要 , 过浓则抑菌 作用不明显 , 过低则菌体生长稀疏 , 抑菌圈不明显或者不规则 , 难以准确测量 (3) 过高的琼脂质量浓度 (2 g/ dL 以上) 冷却至 50 ℃以下倒平板时 , 很快就会凝固 , 不便于制备菌层 ; 而琼脂质量浓度太低时 ( 低于 1 g/ dL) , 培养基不容易凝固 , , 产生的抑 菌圈亦不太规则 . (4) 抗菌肽在牛津杯中的球形扩散过程中 上层培养基越薄 , 越有利于抗菌肽的横向扩散 , 以及培养基越薄 指示菌数相对更少一些 故而抑菌圈大。 （5 ）加注的培养基如果温度太低，就容易结块不能均匀铺开，应为 60-80 o C. 加注培养基底 层之后，不应该立即给双碟加盖，以避免形成水蒸气。 o （6 ）可以事先把配制好的培养基分装在具塞试管内，每管 5mL，湿热灭菌后放在 50 C水浴 锅内保温。试验中，再分别加入菌液混匀，配制成带菌琼脂，继续保温 5min 使培养基温度 回升，倒在底层培养基上，迅速转动双碟使培养基均匀铺开。 （7 ） 放置小钢管时，注意管与管之间、管与双碟边缘不能太靠近。 （8 ）滴加时离钢管口距离不要太高，一旦滴管中出现气泡或者残留，就重新吸取抗生素溶 液进行滴加，滴管口应避免太细。滴加时若有溅出，可用滤纸片轻轻吸去。滴加后，液面应 与小钢管口齐平，液面反光显黑色。 （8 ） 双碟放入培养箱内，要与箱壁保持一定的距离，双碟叠放不能超过 3 个。 （10 ）测量抑菌圈直径时，不易取去小钢管或把双碟翻转过来测量抑菌圈直径。 。 1欢迎下载 精品文档 欢迎您的下载， 资料仅供参考！ 致力为企业和个人提供合同协议， 策划案计划书， 学习资料等等 打造全网一站式需求 。 2欢迎下载