生物化学 酶主要内容.ppt

各种可逆性抑制作用的比较 作用特征 竞争性 抑制 非竞争性 抑制 反竞争性 抑制 与 I 结合的组分 E E 、 ES ES 表观 K m 增大 不变 减小 V max 不变 降低 降低 六、激活剂对反应速度的影响 ? 激活剂 (activator) 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增 加的物质。 ? 必需激活剂 (essential activator) ? 非必需激活剂 (non-essential activator) 七、酶活性测定和酶活性单位 酶的活性 酶的活性单位： 在规定条件下，酶促反应在单位时间 （ s 、 min 或 h ）内生成一定量（ mg 、 ? g 、 ? mol 等）的产物或消耗一定数量的底物所 需的酶量。 国际单位 (IU) 在特定的条件下，每分钟催化 1 ? mol 底 物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。 催量单位 (katal) １催量 (kat) 是指在特定条件下，每秒钟使 １ mol 底物转化为产物所需的酶量。 kat 与 IU 的换算： 1 IU=16.67 × 10 -9 kat 第 四 节 酶 的 调 节 The Regulation of Enzyme 一、底物浓度对反应速度的影响 矩形双曲线 （一）米－曼氏方程式 中间产物学说 E + S k 1 k 2 k 3 ES E + P ※ 1913 年 Michaelis 和 Menten 提出反应速度与 底物浓度关系的数学方程式，即 米－曼氏方 程 式 ， 简 称 米 氏 方 程 式 (Michaelis equation) 。 Ｖ V max [S] K m + [S] ＝ 米－曼氏方程式推导基于两个假设： ①反应刚刚开始，产物的生成量极少，逆反应可 不予考虑。 ②［ S ］超过［ E ］，［ S ］的变化可忽略不计。 当 v=V max /2 时 K m ＝ [S] 1. K m 值等于酶促反应速度为最大反应速度一 半时的底物浓度，单位是 mol/L 。 2 ＝ K m + [S] V max V max [S] V max V [S] K m V max /2 （二） K m 与 V max 的意义 2. K m 可近似表示酶对底物的亲和力； = K m k 1 k 3 k 2 + 3. Km 是酶的特征性常数之一 当 K 2 K 3 时， K m ≈ K s 4. V max 定义： V m 是酶完全被底物饱和时的反应速度， 与酶浓度成正比。 意义： V max =K 3 [E] 如果酶的总浓度已知，可从 V max 计算酶 的转换数 (turnover number) ，即动力学常 数 K 3 。 定义 — 当酶被底物充分饱和时，单位时间内 每个酶分子催化底物转变为产物的分 子数。 意义 — 可用来比较每单位酶的催化能力。 酶的转换数 （三）Ｋ m 值与Ｖ max 值的测定 双倒数作图法 (double reciprocal plot) ，又称为 林 - 贝氏 (Lineweaver- Burk) 作图法 V max [S] K m +[S] V = （林－贝氏方程） 两边同取倒数 V max v 1 = K m . 1 [S] + V max 1 双倒数作图法 二、酶浓度对反应速度的影响 ? 当 [S] ＞＞ [E] ， 反应速度与酶浓 度成正比。 0 V [E] ? 关系式为： V = K 3 [E] ? 双重影响 三、温度对反应速度的影响 ? 最适温度 (optimum temperature) ： 酶促反应速度最 快时的环境温度。 * 低温的应用 酶 活 性 0.5 1.0 2.0 1.5 0 10 20 30 40 50 60 温度 o C 四、 pH 对反应速度的影响 ? 最适 pH (optimum pH) ： 酶催化活性最 大时的环境 pH 。 0 酶