固氮蓝藻和促腐剂对水稻土壤微生物和产量品质的影响.pdfVIP

摘 要 摘 要 水稻种植每年产生大量水稻秸秆，稻秆的不合理利用会造成环境污染和资源的浪费。 秸秆的碳氮比（C/N ）过高影响分解秸秆的微生物发挥作用，需施加化学氮肥来调节腐解 底物的C/N 比，促进稻秸的腐解。固氮蓝藻是具有固氮能力的光合自养型生物，在稻田中 能够长期供氮，如果能够用固氮蓝藻代替化学氮肥发挥作用，在农业生产上具有重要的意 义。本研究采用限制性培养技术构建了固氮蓝藻复合菌系，采用高通量测序技术检测了固 氮蓝藻复合菌系的群落组成，评估了6 种市售秸秆促腐剂配施固氮蓝藻复合菌系组合的腐 解稻秆能力，将固氮蓝藻复合菌系和微生物促腐剂按常规用量施入盆栽水稻水体中，探索 了固氮蓝藻复合菌系和促腐剂对水稻产量和品质的影响，检测了土壤细菌群落结构变化和 土壤酶活性、微生物数量的变化，旨在明晰固氮蓝藻和促腐剂对高产优质水稻土壤细菌群 落的影响，得到如下研究结果： 1. 将取自多个地点的稻田水样和土样混合后，在无氮的BG-11 液体培养基中富集培养 得到固氮蓝藻菌群，提取富集后的固氮蓝藻复合系的微生物菌体DNA ，基于16S rRNA 和 nifH 基因进行高通量测序，分析复合菌系的群落组成，发现该菌系中具有丰度较高的三种 蓝藻类型：湖丝藻 （Limnothrix ）、细鞘丝藻（Leptolyngbya ）和眉藻（Calothrix），还检测 到一些蓝藻的伴生细菌以及一些具有固氮能力的细菌。 2. 利用平板培养法，筛选6 种微生物促腐剂与固氮蓝藻配合降解水稻秸秆效果较好的 组合，设14 组处理，结果发现，6 种促腐剂均能促进水稻秸秆的腐解，培养结束时，配施 QF+L 处理的秸秆失重率最高达30.09% 。在平板培养过程中QF 是较好的促腐剂，且添加 固氮蓝藻能促进提高水稻秸秆的腐解能力。 3. 秸秆 30%还田盆栽水稻条件下，设置4 个处理，即仅秸秆还田 CK、秸秆+促腐剂 （SDS- ）、秸秆+ 固氮蓝藻（CS- ）和秸秆+ 固氮蓝藻+促腐剂处理（SDCS- ），每个处理5 次 重复。试验结果发现：促腐剂（SDS- ）使稻米的垩白度显著升高降低外观品质，降低了甲 基孢囊菌属（Methylocystis ）和参与碳循环的厌氧氨化细菌 （Candidatus_Brocadia ）的类群 的丰度，孕穗期土壤脲酶活性显著降低。固氮蓝藻（CS- ）降低垩白度提高稻米外观品质， 灌浆期土壤中具有生防作用的溶杆菌 （Lysobacter ）和降解微囊藻毒素的鞘脂单胞菌属 （Sphingopyxis ）的丰度升高，孕穗期和灌浆期脲酶显著升高。固氮蓝藻和促腐剂（SDCS- ） 配施处理可降低稻米垩白度，提高稻米外观品质，收获期稻田土壤中具有降解纤维素的噬 细胞菌属 （Cytophaga ）和参与物质循环的菌属 （Syntrophorhabdus ）丰度升高，该处理孕 i 固氮蓝藻和促腐剂对稻土壤微生物和产量品质的影响 穗期和灌浆期的土壤脲酶和蔗糖酶活性显著升高。从细菌群落结构分析发现，SDS、CS 及 SDCS 三处理的细菌群落与CK 相比，土壤中细菌群落发生了明显著改变。 4. 全量还田盆栽水稻条件下，设6 个处理，即仅秸秆还田CK、秸秆+促腐剂（SDS ）、 秸秆+ 固氮蓝藻（CS ）、秸秆+ 固氮蓝藻+促腐剂（SDCS ）、秸秆+促腐剂+减肥20% （SDDS ）、 秸秆+ 固氮蓝藻+促腐剂+减肥20% （SDCDS ），9 次重复。试验结果发现：正常施肥时，促 腐剂（SDS ）能够显著提高水稻理论产量20.38% ，降低了稻米外观品质，土壤样品基于16S rRNA 和 nifH 基因进行高通量测序，发现促腐剂增加了促进植物生长的菌属 （Anaerolineacea e ）、促进稻田土壤中有机碳分解的厌氧绳菌属 （Anaerolinea ）、分解枯木 的菌属 （Acidobacteriales-norank ）的丰度，土壤中某些细菌的丰度降低，如参与砷循环的 地杆菌属 （Geobacter）、衡量农药残留量指标的纤绳菌属 （Leptolinea ）和抑制土壤中甲烷 产生的脱硫叶菌属 （Desulfobulbus ）的丰度，土壤过氧化氢酶、蔗糖酶和磷酸酶活性显著 升高。CS、SDCS 和 SDCDS 均能降低稻米的垩白度提高外观品质，来自固氮蓝