桦褐孔菌三萜类化合物的提取纯化及抗氧化活性研究.pdf

目 录 中文摘要I 英文摘要III 常用缩写词中英文对照表VI 前 言1 第一部分 响应面法优化桦褐孔菌总三萜回流提取工艺2 1 材料与方法2 1.1 材料2 1.2 方法3 2 结 果7 2.1 标准曲线的绘制7 2.2 桦褐孔菌三萜类化合物提取工艺的比较结果7 2.3 单因素优化桦褐孔菌总三萜回流提取工艺结果8 2.4 响应面法优化提取桦褐孔菌总三萜的实验结果13 2.5 验证试验17 3 讨 论18 4 结 论20 第二部分 大孔吸附树脂纯化桦褐孔菌总三萜工艺的研究21 1 材料与方法21 1.1材料21 1.2 方法22 2 结 果26 2.1 静态吸附-解吸实验结果26 2.2 动态吸附-解吸实验结果29 3 讨 论36 4 结 论37 第三部分 桦褐孔菌三萜类化合物抗氧化活性研究38 I 1 材料与方法38 1.1 材料38 1.2 方法39 2 结 果41 2.1DPPH 清除率的测定结果41 2.2ABTS 清除率的测定结果41 3 讨 论43 4 结 论44 参考文献45 综 述50 致 谢59 个人简历60 II 山西医科大学硕士学位论文 桦褐孔菌三萜类化合物的提取纯化及抗氧化活性研究 摘 要 目的： 桦褐孔菌中主要含有多糖、三萜、多酚等，三萜是桦褐孔菌中重要的生物活性成 分之一。大量研究显示，三萜类具有抗氧化、抗病毒、抗炎和防治糖尿病等功能。本 文对桦褐孔菌中三萜类化合物进行提取纯化及体外抗氧化活性研究，为桦褐孔菌三萜 类化合物应用于天然食品、保健食品、药品奠定基础。 方法： （1）本试验运用紫外可见分光光度法测定总三萜类化合物的含量；通过单因素 实验考察提取溶剂、回流温度、回流时间、料液比以及提取次数对总三萜含量的影响； 在单因素试验的基础上，采用响应面分析法，以总三萜含量为响应值，通过回归分析 回流温度、回流时间、料液比与响应值之间的关系，优化桦褐孔菌总三萜提取工艺条 件。 （2）为得到高纯度的桦褐孔菌三萜类化合物，本试验采用大孔吸附树脂分离纯 化桦褐孔菌总三萜。分别对上样条件和洗脱条件进行优化，通过对比5 种大孔树脂 对桦褐孔菌三萜吸附-解吸效果，筛选出AB-8大孔树脂为最佳纯化材料，并通过单因 素实验，考察上样液质量浓度、上样流速、洗脱剂体积分数、洗脱流速、洗脱剂用量 对吸附解吸性能的影响。 （3）通过清除DPPH、ABTS 自由基实验，考察所富集桦褐孔菌三萜类化合物的 体外抗氧化活性，为桦褐孔菌的药物和保健食品开发提供参考依据。 结果： （1）本试验通过优化桦褐孔菌总三萜回流提取工艺，确定最佳提取工艺为：提 取溶剂异丙醇、回流温度80 ℃、回流时间2.5h、料液比1:22 、提取次数1次。在 最佳工艺条件下，桦褐孔菌中总三萜含量可达13.15±0.023mg/g，与理论值 13.12mg/g I 山西医科大学硕士学位论文 非常接近，即实际值与预测值之间的拟合度较好。 （2）通过大孔吸附树脂分离纯化桦褐孔菌总三萜，最终确定最佳工艺为：上样 液质量浓度0.2mg/mL，上样流速1mL/min，上样体积14BV，洗脱流速1mL/min， 最后用60%乙醇洗杂，90%乙醇洗脱18BV，在此条件下，三萜类化合物的纯化率可 达到85.13±2.658%。 （3）研究表明，桦褐孔菌粗三萜有较好的抗氧化活性。桦褐孔菌总三萜类的抗 氧化能力强弱呈现明显的剂量效应关系，在实验范围内 （0~1.0 mg/mL），对清除 DPPH、ABTS 自由基