刚地弓形虫排泄_分泌抗原（ESA）诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的研究.pdf

目录 摘 要I AbstractIV 常用缩写词中英文对照表VIII 前 言1 第一部分 弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）的获取3 1材料与方法3 1.1实验材料3 1.2实验方法5 2 结果7 刚地弓形虫ESA浓度测定7 3 讨论8 4 结论 10 第二部分 探究刚地弓形虫ESA对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用11 1材料与方法11 1.1 实验材料11 1.2实验方法12 2 结果 15 2.1弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制的影响15 2.2 弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）对PC-3细胞迁移的影响15 2.3 弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）对PC-3细胞侵袭的影响16 2.4 弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）对PC-3细胞周期的影响18 2.5 弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）对PC-3细胞凋亡的影响19 3 讨论21 4 结 论24 第三部分 刚地弓形虫ESA对PC-3细胞凋亡机制的相关研究25 1材料与方法25 1.1 实验材料25 1.2 实验方法25 2 结果26 2.1流式细胞仪检测ESA对PC-3细胞的P-gp含量的影响26 2.2流式细胞仪检测ESA对PC-3细胞内活性氧 （ROS）含量的影响27 3 讨 论30 4 结 论32 参考文献33 综述37 致 谢46 个人简介47 山西医科大学硕士学位论文 刚地弓形虫排泄/分泌抗原 （ESA）诱导前列腺癌PC-3细胞凋 亡的研究 摘 要 目的： 前列腺癌(PCa)是男性常见的恶性肿瘤之一,内分泌治疗一般是该病的首选 治疗方案，但治疗后期患者多发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)，化疗目前是 CRPC 重要治疗手段。鉴于化疗的副作用明显，而且不能显著延长生存期，临 床迫切需要新的药物替代治疗或者辅助治疗，改善患者的生存现状。近年来的 研究发现，弓形虫及其代谢产物可以改变细胞周期，诱导肿瘤细胞的凋亡，而 弓形虫的排泄/分泌抗原 （ESA）作为强免疫原，可以诱导机体产生强免疫应答 反应，是作为疫苗的首选物质，同时又能诱导多种肿瘤细胞的凋亡。因此，本 课题选用 ESA 作用于前列腺癌 PC-3 细胞，观察其对 PC-3 细胞增殖、迁移、侵 袭和凋亡的影响并探讨其机制，为寄生虫抗肿瘤的新兴疗法奠定理论基础。 方法： 1. CCK-8 ESA PC-3 采用 法检测刚地弓形虫 对 细胞增殖抑制的影响。 2. ESA PC-3 采用细胞划痕法观察刚地弓形虫 对 细胞迁移能力的影响。 3. Transwell ESA PC-3 采用 小室法观察刚地弓形虫 对 细胞侵袭能力的影响。 4. ESA PC-3 P-gp 通过流式细胞术检测刚地弓形虫 对 细胞周期、凋亡、活性氧和 含量的影响。 结果： 1.CCK-8结果显示：当 ESA 浓度≧1000ug/ml 时，PC-3细胞出现增殖抑制，并 且当ESA 浓度≧4000ug/ml 时，ESA对PC-3细胞的增殖抑制效果呈时间—剂量依赖 性 （P ﹤0.05）。 I 山西医科大学硕士学位论文 2.细胞划痕结