TaCOL6基因调控小麦生育期的功能鉴定与机理分析.pdfVIP

符号说明 SNP:Singlenucleotidepolymorphism，单核苷酸多态性 PCR:Polymerasechainreaction，聚合酶链式反应 bp:basepairs，碱基 Kb:kilobasepairs，千碱基对 GA:Gibberellin，赤霉素 NFS:North-facing slope，向北斜坡 SFS:South-facing slope，向南斜坡 SDS:sodium dodecyl sulfate，十二烷基磺酸钠 ES:European slope，欧洲斜坡 AS:African slope，非洲斜坡 LB:luria-bertanimedium LB ， 培养基 BiFC:bimolecular fluorescencecomplementation，双分子荧光互补 EMSA:electrophoreticmobility shift assay，凝胶迁移实验 PAGE:polyacrylamidegel electrophoresis，聚丙烯酰胺凝胶电泳 EB:ethidiumbromide，溴化乙锭 GFP:Green Fluorescent Protein，绿色荧光蛋白 LD:longdaylength，长日照 SD:short daylength，短日照 IPTG:Isopropyl β-D-Thiogalactoside，异丙基硫代半乳糖苷 WT:wildtype，野生型 As:acetosyringone，乙酰丁香酮 Amp:ampicillin，氨苄青霉素 DMSO:dimethylsulfoxide，二甲基亚砜 目 录 中文摘要I 英文摘要III 1. 前言1 1.1植物开花途径研究进展1 1.1.1光周期途径2 1.1.2 其它植物开花诱导途径3 1.2 植物开花基因研究进展5 1.2.1FT基因5 1.2.2 CO 6 光周期开花途径关键基因 基因 1.3 逆境胁迫7 1.4 群体选择分析8 1.4.1选择消除分析概述8 1.4.2 跨群体混合似然比法原理9 1.4.3群体多样性概述9 1.5 小麦微核心种质9 1.6本研究的背景和目的意义10 1.6.1研究背景10 1.6.2 目的意义10 2. 材料与方法11 2.1实验材料11 2.1.1植物材料11 2.1.2 实验菌株11 2.1.3载体质粒11 2.2 常用培养基及试剂配制11 2.2.1常用培养基配制11 2.2.2 常用试剂配制13 2.3 实验方法14 2.3.1 植物DNA 提取14 2.3.2 群体遗传学统计分析15 2.3.3RNA 相关实验15 2.3.4 构建载体16 2.3.5 酵母感受态细胞的制备和酵母转化20 2.3.6酵母单杂交实验21 2.3.7 酵母双杂交实验22 2.3.8IPTG 诱导原核表达23 2.3.9凝胶迁移实验EMSA25 2.3.10转化农杆菌28 2.3.11农杆菌介导的短柄草转基因29 2.3.12 农杆菌介导的小麦转基因30 2.3.13 BiFC 30 双分子荧光互补实验 （ ） 2.3.14 小麦抽穗整齐度表型调查31 3. 结果与分析31 3.1群体遗传学统计分析31 3.2 TaCOL6基因在二穗短柄草中的功能验证34 3.3 TaCOL6基因调控生育期的机理研究34 3.3.1验证结合位点34 3.3.2 TaCOL6基因位点突变后造成SFS1晚花37 3.4 小麦转基因验证非生物胁迫条件下TaCOL6基因对花期的调控38 3.5探索干旱条件下小麦早花分子机制39 3.5.1 TaCOL6 NF-Y 39 酵母双杂交验证 与 家族部分基因的关系