抗生素类药物分析2.pptVIP

抗生素类药物的分析;主要内容;学习要求;第一节 概 述;二、抗生素类药物的分类;;三、抗生素类药物的细菌耐药性;四、抗生素药物的质量分析;（三）含量或效价测定;2.理化方法：主要是HPLC法;3.抗生素活性表示方法：;第二节 β-内酰胺类抗生素 ;;头孢菌素类;2.性质;青霉素的降解反应;头孢菌素类;二、鉴别试验;（二）光谱法;;;三、呈色反应;;;3.其他呈色反应;（四）各种盐反应;三、检查;;;（二）有关物质和异构体;;（三）吸光度 杂志吸光度方法;四、含量测定;eg Chp头孢克洛含量的HPLC测定法 色谱???件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸二氢钾溶液-乙腈（92:8）为流动相，检测波长为254nm。取头孢克洛对照品及头孢头孢克洛δ-3-异构体对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中分别含头孢克洛及头孢克洛δ-3-异构体约0.2mg的混合溶液，取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，头孢克洛峰与头孢克洛δ-3-异构体峰的分离度应符合要求。; 测定法：取本品约20mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取头孢克洛对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算出供试品中C15H14ClN3O4S的含量。规定按无水物计算，含C15H14ClN3O4S不得少于95.0%。;（二）生物样品中β-内酰胺类抗生素的分析;第三节 氨基糖苷类抗生素;一、化学结构和性质;;;D-葡萄糖胺;;;庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3;（二）;;二、 ; Molisch 试验;1.α-萘酚呈色原理;2.蒽酮的呈色原理;（三）N-甲基葡萄糖胺反应 例：取本品约10mg,加水1ml,溶解后,加盐酸溶液（9→100）2ml,在水浴中加热10min,加8%氢氧化钠溶液2ml与2%乙酰丙酮水溶液1ml,置水浴中加热5min,冷却后，加对二甲基苯甲醛试液1ml,即呈樱桃红色。 ;（四）麦芽酚反应 链霉素的特征反应 例 硫酸链霉素的麦芽酚反应鉴别：取本品约20mg,加水5ml溶解后,加氢氧化钠试液0.3ml,置水浴上加热5min,加硫酸铁铵（取硫酸铁铵0.1g,加0.5mol/L硫酸溶液5ml溶解）0.5ml,即成紫红色。 ;（五）坂口反应 链霉素水解产物链霉胍的专属反应 （六）硫酸盐反应;（七）色谱法 1.TLC Chp2010采用TLC法对本类抗生素进行鉴别。 薄层板：硅胶G 展开剂：三氯甲烷-甲醇-浓氨水 显色剂：茚三酮或碘蒸气 例: 硫酸庆大霉素注射液 取本品与庆大霉素标准品，分别加水制成每1ml中含2.5mg的溶液，作为供试品溶液和标准品溶液，照TLC试验，吸取上述两种溶液各20ul,分别点于同一硅胶G薄层板（临用前于105℃活化2h）上；另取三氯甲烷-甲醇-氨溶液（1:1:1）混合振摇，放置1h,分取下层混合液为展开剂，展开，取出于20~25℃晾干置碘蒸气中显色，供试品溶液所显主斑点数、位置和颜色应与标准品溶液斑点数、位置和颜色相同。; 2.HPLC 通过比较供试品溶液和对照品溶液的色谱图进行鉴别。 （八）光谱法 1.IR Chp和Bp均采用红外光谱鉴别本类药物 1.UV 本类药物多无紫外吸收，所以较少用。 ;三、杂质检查及组分分析 （一）链霉素中链霉素B的检查 （甘露糖链霉素） 1.来源 发酵时菌种产生 2.效价 链霉素的20~25% 3方法 TLC（甘露糖对照品法）;例 供试品溶液：取本品0.2g,精密称定,置回流用圆底烧瓶中，加入新鲜配制的硫酸-甲醇溶液（3；97）5ml,加入回流1h，冷却，用甲醇冲洗冷凝管，合并冲洗液，并用甲醇稀释至20ml,作为供试品溶液（每1L中含10g的溶液）。 对照品溶液：精密称取甘露糖对照品约36mg,置回流瓶中，同法处理后定量制成每1L中含链霉素B相当于0.3g的溶液，作为对照溶液（1mg甘露糖相当于4.13mg的链霉素B）。 操作：硅胶G薄层板；取上述两种溶液各10ul,分别点于同一薄层板上，以冰醋酸-甲醇-丙酮（25:25:50）为展开剂，展开13~15cm;晾干，喷以新鲜配制的显