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甘油的检测方法汇总 甘油的检测方法汇总 在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体， 在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体， 会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单 会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单 位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品 位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品 生产率的关键。在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物 生产率的关键。在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物 柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。此外，甘 柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。此外，甘 油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普 油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普 遍用作细胞内冷冻保护剂等。由于甘油用途很广，因此其含量的测定具 遍用作细胞内冷冻保护剂等。由于甘油用途很广，因此其含量的测定具 有非常重要的意义。 有非常重要的意义。 2 + 目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu2 + 目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu 络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、 络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、 气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。下面将对其进行简要概 气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。下面将对其进行简要概 述： 述： 、 高碘酸法 、 高碘酸法 1 1 1.原理：高碘酸氧化法是 目前常见用于甘油含量检测的方法，利用高碘 1.原理：高碘酸氧化法是 目前常见用于甘油含量检测的方法，利用高碘 酸与甘油发生氧化还原反应，剩余高碘酸及反应生成的碘酸与碘化钾反 酸与甘油发生氧化还原反应，剩余高碘酸及反应生成的碘酸与碘化钾反 应生成碘，再用硫代硫酸钠进行滴定，根据消耗的硫代硫酸钠的量来计 应生成碘，再用硫代硫酸钠进行滴定，根据消耗的硫代硫酸钠的量来计 算甘油的含量。 算甘油的含量。 2.操作步骤 2.操作步骤 准确发酵液10ml于100mL小烧杯中，加少量水溶解，然后转移至100mL容 准确发酵液10ml于100mL小烧杯中，加少量水溶解，然后转移至100mL容 量瓶中，用水稀释至标线，摇匀，静置。用移液管准确移取10mL上述溶 量瓶中，用水稀释至标线，摇匀，静置。用移液管准确移取10mL上述溶 液于碘量瓶中，加入20mL高碘酸钠溶液，混合均匀后，于黑暗中避光静 液于碘量瓶中，加入20mL高碘酸钠溶液，混合均匀后，于黑暗中避光静 置40min，然后加入碘化钾溶液和20%盐酸溶液各15mL，调节pH值在0.8 置40min，然后加入碘化钾溶液和20%盐酸溶液各15mL，调节pH值在0.8 ～1.0之间，然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时，加入2mL淀粉 ～1.0之间，然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时，加入2mL淀粉 指示剂溶液，继续滴定至溶液蓝色消失。同时做试样空白。 指示剂溶液，继续滴定至溶液蓝色消失。同时做试样空白。 3.计算： 3.计算： 式中：w——样品中甘油的含量，％； 式中：w——样品中甘油的含量，％； V1——空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL； V1——空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL； V2——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL； V2——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL； C——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol／L；M——甘油相对分子质量； C——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol／L；M——甘油相对分子质量； 、 酶比色法 、 酶比色法 2 2 1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方 1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方 法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧 法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧 化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，然后过氧化氢和4-氨基安普比 化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，