（精选课件）细菌的培养方法.pptVIP

方法： （1块／3人） 打开血平板，将平板置于口腔前约15cm处，对准培养基表面用力咳嗽3～4次，然后盖好平板盖，放置于37℃孵箱内培养24小时观察 结果。 * 在人体的皮肤表面有多种细菌存在，用水洗手或用肥皂洗手，可以除去皮肤上的污垢和灰尘，从而减少手上细菌的数量，但并不能有效的杀死细菌。而日常医疗、试验工作中常用的化学消毒剂如碘酒、酒精等有很好的杀菌作用，它们不仅对细菌的繁殖体，对芽孢也有一定的杀灭效果，所以在临床医疗中广泛应用。 正常人体皮肤及随身物品的细菌检查 * 1、将平板底部用mark笔划线分成均匀的8个区，分别标记为①②③④⑤⑥⑦⑧。 2、用右手的食指在①区上轻轻按一下，然后用肥皂在流水下将手洗干净，用无菌棉签拭干右手食指皮肤上的水，再轻轻在②区培养基上按一下。 3、用左手食指轻轻在③区按一下，然后用棉签蘸碘酒消毒左手食指皮肤，待干后轻轻在④区按一下。 4、任取随身物品在⑤⑥⑦⑧区各按一下。 5、盖好平板，送37℃孵箱培育24小时后观察结果。 操作与注意事项（1块／3人） * 注意事项： 用手指或物品按培养基时，接触面可稍微大一些，但切勿用力，否则，易将培养基压破，影响结果的判断。如果不慎压破，可在临近未破处重新按一下。 * 三线法分离接种 * 细菌的分离接种 琼脂平板划线分离接种法（固体培养基） 三线法 穿刺接种法（半固体培养基） 液体培养基接种法 接种时要注意无菌操作，避免污染，防止细菌外溢污染环境。 * * 斜面培养基接种 * 半固体穿刺 * 液体培养基接种 * 思考题 1.“三线法”分离接种细菌的主要目的是么？ 2. 为什么有的时候在接种细菌后，通过培养没有细菌生长？ 3. 酒精的最佳杀菌浓度？ * 实验三、 细菌接种及分离培养； 自然界及正常人体的细菌检查 * 教学目标 1. 熟悉常用的纯种细菌的接种方法。 2. 掌握标本中细菌的分离培养技术。 3. 了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”。 4. 深刻认识“无菌操作”对于微生物实验及医药学实践的重要性。 5．进一步理解“正常菌群”的概念。 * 实验主要内容 1．录相：细菌的培养方法 2．操作： ⑴空气中细菌的检查 （沉降法 血平板 1块/6人） ⑵呼吸道细菌的检查 （咽拭子法培养 血平板 1块/3人） ⑶随身物品的细菌检查（手指消毒前后 普通平板1块/3人） ⑷细菌的接种法（液体、半固体、固体 1套/3人） 材料： ⑴ 大肠埃希菌培养物 （1支/6人） ⑵ 碘酒、75%酒精、棉签等 （1套/6人） * 培养基的制备 一、培养基（culture medium） 由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。 * （一）培养基的类型及应用 1、按用途划分 1）基础培养基 能满足一般细菌生长繁殖的营养需要，如肉 汤（包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等）。 2）营养培养基 在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、 酵母浸膏等。 * 3）鉴别培养基 4）选择培养基 用于鉴别不同类型细菌的培养基。特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种细菌与其他细菌区分开来。 将某种细菌从混杂的细菌群体中分离出来的培养基。根据不同种类细菌的特殊营养需求，在培养基中加入相应的特殊营养物质；或者加入某些化学物质，抑制不需要的细菌生长，有利于所需细菌的生长。 5）厌氧培养基 * SS琼脂培养基 （Salmonella-Shigella agar） 大肠埃希菌 沙门菌 志贺菌 * 2、根据物理状态划分 液体培养基：增菌 固体培养基（琼脂浓度为2－3％）： 增菌，分离培养 半固体培养基（琼脂浓度为0.2-0.