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实验 19 药物抗惊厥作用 Experiment 19. The anti-convulsion function of drugs 药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用 观察抗癜痫药 sodium phenobarbital （苯巴比妥钠）预防 性对抗电刺激引起的小鼠惊厥作用。 实验目的 电惊厥法是利用电流刺激动物诱发惊厥，并利用这种实 验模型来筛选抗癫痫大发作的药物。目前最常用的方法是最 大电休克发作实验 (maximal electroshock seizure test,MES) 。 一般认为， MES 是癫痫大发作的实验模型，受试化合物若能 明显对抗 MES ，则该化合物有可能发展成为在临床上治疗癫 痫大发作有效的药物。 实验原理 1. 苯巴比妥能选择性地抑制癫痫灶中的异常神经元、防止 或减少其过度放电，抑制病灶的点燃和传播。这种抑 制作用与脑内抑制性递质 γ - 氨基丁酸的含量增高有关。 2. 动物实验表明苯巴比妥能提高电刺激大脑皮层运动区及 间脑的最低阈值。 苯巴比妥 的作用机制 动物 : ICR 小鼠 药品： 0.5% sodium phenobarbital 溶液 仪器： JTC-1 型惊厥及痛觉实验交流电刺激器 1. 材料 ? 将“输出电压”调到 20 伏 ? 刺激时间设为 0.5s ? 刺激周期设为单刺激 ? 如不发生惊厥，将输出电压增大，再试 2. 方法 2.1 准备 将输出电压调到 20 伏、时间 0.5s ，刺激周期设为单刺激 ( 第 1 次电惊厥试验 ) ↓ 挑选发生电惊厥反应的小鼠（用苦味酸标记 1 、 2 、 3------ ） ↙ ↘ ip 0.5% 苯巴比妥钠 0.1ml/10g ip 生理盐水 0.1ml/10g ↓ 15min 电惊厥试验 ( 第 2 次 ) ↓ 记录结果（ + 发生惊厥、 - 未发生惊厥） 2. 方法 2.2 实验流程 2.3 操作和观察 ① 先将电惊厥仪输出线的鳄鱼夹尖端用生理盐水浸湿， 一个夹子夹小鼠两耳根间的皮肤，另一个夹下颚部。 ② 电惊厥刺激 惊厥指标： 双后腿强直 惊厥发生过程： 僵直屈曲期→ 后肢伸直期→ 阵挛期→ 恢复期 2. 方法 ③ 将有电惊厥反应的小鼠 , 称体重后用苦味酸分别做记号 , 编 为甲、乙两组 , 甲鼠 ip 5g/L phenobarbital sodium 溶液 0.1ml/10g ，乙鼠 ip 生理盐水 0.1ml/10g 。 注射 15min 后，按照各个小鼠第一次发生惊厥的电压，再 次进行电惊厥实验，观察是否再次发生惊厥。 ④ 记录结果 2. 方法 3. 结果 表 1. 电惊厥实验结果汇总表 表 2. 苯巴比妥钠对电刺激引起小鼠惊厥作用的影响 4. 讨论 思考题： 电刺激引起小鼠惊厥的发生机制； 分析苯巴比妥钠抗电刺激引起小鼠惊厥作用的机制。 注意事项 （ 1 ）实验前选择动物 , 电刺激后不产生后肢强直者不用于实验。 （ 2 ）注意安全 用右手从笼盒内将小鼠尾部捉住并提起，放在笼盖（或表面粗糙的 物体）上，轻轻向后拉鼠尾，在小鼠向前挣脱时，用左手拇指和食指抓 住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部。 小鼠的捉拿方法 腹腔注射时，使小鼠头部朝下， 将注射针与小鼠腹部皮肤呈 90o ； 由下腹中线偏左或偏右约 1-2 mm 处下针，约插入 3-5 mm 即 可开始将药剂注入腹腔。 腹腔注射 小鼠标记方法： 5 （ 6 ） 1 2 （ 7 ） 背 （ 8 ） 3 4 （ 9 ） 10 实验 19. 药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用 1. 摘要（结构式摘要 : 目的、方法、结果、结论） 2. 材料和方法： 2.1 材料： 2.2 方法： 3. 实验结果 3.1 原始数据表 实验报告要求：