微生物的实验室培养 复习课堂.pptVIP

32 本课题知识小结 微 生 物 的 实 验 室 培 养 培养基 无菌技术 制备牛肉蛋白胨固 体培养基 纯化大肠杆菌 结果分析与评价 培养基的类型 培养基的营养物质 避免杂菌污染的方法 实验室常用的消毒方法 实验室常用的灭菌方法 平板划线法 稀释涂布法 （步骤） 33 编号 成分 含量 ① 粉状硫 10g ② （ NH 4 ） 2 SO 4 0.4g ③ K 2 HPO 4 4.0g ④ MgSO 4 9.25g ⑤ FeSO 4 0.5g ⑥ CaCl 2 0.5g ⑦ H 2 O 100ml 例 3 ．右表是某微生物 培养基成分，请据此回 答： （ 1 ）表中营养成分共 有 类。 （ 2 ）右表培养基可培 养的微生物类型 是 。 自养型微生物 3 34 （ 3 ）若除去成分② （ NH 4 ) 2 SO 4 ，加（ CH 2 O ），该培养基可用于培 养 。 （ 5 ）不论何种培养基，在各种成分都 溶化后分装前，要进行是 。 （ 6 ）右表中各成分重量确定的原则 是 。 （ 7 ）若右表培养基用于菌种鉴定，应 该增加的成分是 。 固氮微生物 调整 pH 依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂） 课题 2 土壤中分解尿素的细菌的 分离与计数 一、课题背景 1 、尿素的利用 尿素 是一种重要的 农业氮肥。 尿素 不能 直接 被农作物 吸收。 土壤中的细菌将尿素 分 解成氨 之后才能被植物利用。 2 、细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们 能合成脲酶 CO(NH 2 ) 2 脲酶 + CO 2 2NH 3 + H 2 O 尿素是 培养基中的 唯一氮源 ， 只有能合成 脲酶 的微生物才能分解尿素， 以尿素作为氮源，才能生长。 缺乏 脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺 乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所 以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 5 、该培养基选择分解尿素的微生物的原理 选择培养基： 在微生物学中，将 允许 特定种类的微生物生长，同时 抑制或阻止 其他种类微生物生长的培养基。 1 、显微镜直接计数： 利用 血球计数板 ，在显微镜下计算一定容积 里样品中微生物的数量。 ㈡ . 统计菌落数目： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察； 缺点 2. 间接计数法（ 活菌计数法） ⑴原理： 在稀释度足够高时，微生物在固 体培养基上所形成的 一个菌落 是由 一个单 细胞 繁殖而成的，即 一个菌落代表原先的 一个单细胞。 ⑵常用方法：稀释涂布平板法。 每克样品中的菌落数＝ (C ÷ V) × M 其中， C 代表某一稀释度下平板上生长的平 均菌落数， V 代表涂布平板时所用的稀释液 的体积 (ml) ， M 代表稀释倍数。 1 课题 1 微生物的实验室培养 专题 2 微生物的培养与应用 1. 提供合适的营养和环境条件 2. 防止 其他微生物 污染 2 2. 基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 3. 特殊营养： （有些微生 物需要） （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） 4.pH 、氧气、二氧化碳、渗透压的需求： 一、培养基 如 : 生长因子 ( 即细菌生长必需， 而自身不能合成的化合物 , 如维生 素、某些氨基酸、碱基等 ) 按照微生物对 营养物质 的不同需求，配制出 供其生长繁殖的营养基质。 1. 概念： 不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 3 营养物质 定义 作用 主要来源 碳源 凡能提供 所需碳元 素的物质 合成生物体的 细胞物质和一 些代谢产物； 有些是异养生 物的能源物质 氮源 凡能提供 所需氮元 素的物质 合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物 ① 无机 化合物： CO 2 、 NaHCO 3 等。 ② 有机 化合物：糖类、 脂肪酸、花生粉饼、 石油、牛肉膏、蛋白 胨等 ①无机化合物： N 2 、 NH 3 、铵盐、硝酸盐。 ②有机化合物： 尿素、 牛肉膏、蛋白胨、酵 母膏等 自养微生物 异养微生物 注：含 C 、 H 、 O 、 N 的 有机物 是 异 养型微 生物的 碳源 、 氮源 、 能源， 如牛肉膏 硝化细菌 4 营养物质 定义 作用 主要来源 生长因子 生长必不 可少的微 量有机物 酶和核酸的组成成 分 无机盐 矿物质 参与酶的组成；调 节渗透压 —— 水 —— 作为溶剂和运输的 介质；参与生化反 应 —— 牛肉膏、酵母膏、 动物组织提取液等 备注： (1) 不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大。 (2) 微生物最常利用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用 的氮源是铵盐、硝酸盐。 (3) 对异养微生物来说，含 C 、 H 、 O 、 N 的化合物既是碳源又 是氮源和能量来源。 (4) 微生物之所以需要补充生