淮北塌陷区南湖水体典型抗生素抗性基因赋存特征研究.pdf

淮北塌陷区南湖水体典型抗生素抗性基因 赋存特征研究 摘要 抗生素是在微量浓度能够抑制细胞生长的一类化合物。磺胺抗生素是第一种 人工合成的抗生素，被广泛应用畜禽养殖业。磺胺类抗生素的大量使用 （滥用）， 诱导环境微生物产生磺胺抗性基因，并成为一种广受关注的新型环境污染物。不 同环境基质中磺胺抗性基因存在较大差异。采煤塌陷形成的湖泊是淮北的特征水 体，本论文调查了淮北杨庄矿采煤塌陷区南湖水体中7种典型磺胺类抗生素（磺 胺、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑和磺胺二甲氧 嘧啶）及其抗性基因 （sul1,sul2,sul3 和sulA）和一类整合子整合酶基因 （int1） 的赋存状况，结果如下： （1）磺胺、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑 和磺胺二甲氧嘧啶在淮北南湖水体环境中均被检出。磺胺类抗生素在南湖水体和 底泥样品中的检出频率和浓度因采样点而异。水体样品中，除了磺胺和磺胺二甲 嘧啶没有被检出外，磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲噁唑和磺胺二甲氧 嘧啶的检出频率分别为30%，10%，30%，90%和70%。相应地，它们在水体中 的平均浓度分别为5.54 ng/L，2.36ng/L，7.87ng/L，28.26ng/L 和20.78ng/L。 在底泥样品中，磺胺甲噁唑的检出频率和检出浓度最高，分别为100%和76.16 ng/L；紧接着是磺胺嘧啶，其检出频率和浓度分别为40%和30.29ng/g，磺胺噻 唑则没有被检出。总体上，底泥样品中磺胺抗生素的检出频率和检出浓度高于水 体样品。 （2）从淮北南湖水体和底泥样品中PCR 扩增到磺胺抗性基因sul1、sul2 和 一类整合子整合酶基因int1，但所有样品中均没有扩增到磺胺抗性基因sul3 和 sulA。Sul1基因在底泥中的检出频率为100%，其在水体样品中的检出率为90%。 Sul2 基因在底泥和水体样品中的检出频率低于sul1 的检出频率，均为80%。类 似于sul1，一类整合酶基因int1在底泥和水体中的检出频率分别为100%和90%。 （3）Sul1、sul2 和int1基因在南湖水体样品中的丰度存在较大差异，分别 5 6 6 为6.25×10 copy/mL、1×10 copy/mL 和1.12×10 copy/mL。同一基因在不同采 样点间也存在较大差异，sul1基因在3 号水体样品中的丰度最高，为1.50×106 copy/mL，而在7 号水样中其丰度则低于检出限。10 号水样中sul2 基因丰度最高， 6 6 为2.78×10 copy/mL；int1基因在8号水样中的丰度最高，为2.26×10 copy/mL， 6 1号水样中int1基因的丰度略低于8号水样，为2.04×10 copy/mL。总体而言， 6 1号水体样品中的基因丰度最高，为5.29×10 copy/mL，其次是10 号水样，总 6 6 丰度为4.75×10 copy/mL，7 号水体样品中的总丰度最低，为1.30×10 copy/mL。 Sul1、sul2 和int1 基因在底泥样品中的丰度存在较大差异，分别为9.34×105 6 6 copy/g、1.14×10 copy/g 和1.3×10 copy/g。Sul1在1号底泥样中的基因丰度最 6 高为3.06×10 copy/g，在3 号底泥样中其丰度则低于检出限。Sul2 基因的平均 丰度高于sul1基因的平均丰度。Sul2 基因丰度最大的是1号底泥样 （2.64×106 copy/g），2 号和10 号底泥样中sul2 的丰度则低于检出限。Int1基因在7 号底泥