单克隆抗体和多克隆抗体地区别.pdfVIP

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  • 2020-09-08 发布于江苏
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单克隆抗体和多克隆抗体有很多区别 首先 1.制备上的区别 经过特定抗原处理过的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经 HAT 培养基筛选、 ELISA 检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细 胞注入到动物 (一般为 balb/c 小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清 /腹水纯化后就能得到单克隆抗体。 而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好) 直接注入到动物体内进行免疫,经过 3~4 次免疫, ELISA 测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次 制备价格也比单抗要低。 2.应用上的区别 单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。但如果所识 别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异, 因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在 WB 中有杂带,在 IHC 中背景较深等等。虽然还存在着交叉反应 *的问题, 但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个

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