本科生毕业设计（论文）开题报告-高岩 修改！！！.docVIP

毕业设计(论文)开题报告 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 本科生毕业设计（论文）开题报告 论文题目： 黄瓜遗传转化体系优化及 Bi基因转化 学生姓名: 高岩 学生学号: 5091509017 专 业: 植物生物技术 指导教师: 蔡润 学院 (系): 农业与生物学院 教务处制表 填表说明 根据《上海交通大学关于本科生毕业设计(论文)工作的若干规定》要求，每位学生必须认真撰写《毕业设计（论文）开题报告》。 每位学生应在指导教师的指导下认真、实事求是地填写各项内容。文字表达要明确、严谨，语句通顺，条理清晰。外来语要同时用原文和中文表达，第一次出现的缩写词，须注出全称。 开题前，须进行文献查阅，要求与论文研究有关的主要参考文献阅读数量不少于10篇，其中外文资料应占一定比例。参考文献的书写请参照《上海交通大学本科生毕业设计（论文）撰写规范》。 毕业设计（论文）开题报告总字数应满足本院（系）要求。 请用宋体小四号字体填写，并用A4纸打印，于左侧装订成册。 该表填写完毕后，须请指导教师审核，并签署意见。 《上海交通大学本科生毕业设计（论文）开题报告》将作为答辩资格审查的主要材料之一。 本表格不够可自行扩页。 毕业设计(论文)开题报告 论文题目 黄瓜遗传转化体系优化及Bi基因转化 课题来源 课题性质 项目编号 课题研究目的和意义（含国内外研究现状综述）： 黄瓜(Cucumis sativus L.)，属葫芦科（Cucurbitaceae），为一年生攀缘性草本植物。染色体数为2n=2x=14。黄瓜栽培历史悠久，经过长期栽培与驯化，分布于世界各地【1,2】。黄瓜深受人们喜爱，有很高的研究和开发价值【3】。黄瓜生产上，特别是在保护地条件下，由于遗传因素作用和栽培管理不当，会产生苦味果实。苦味黄瓜没有经济价值，导致收益损失【4】。瓜类植物的苦味是由一类称为葫芦素(Cucurbitacins)的物质引起【5】。葫芦素属于葫芦烷型四环三萜化合物，对大多数生物体有毒【6】。控制苦味果实产生最有效的方法是选育无苦味黄瓜品种。研究黄瓜果实苦味基因的遗传规律以及果实葫芦素合成代谢的相关基因，对于指导进行无苦味黄瓜分子设计育种，以及对于明确葫芦烷型四环三萜化合物合成和果实苦味形成的分子机理都具有重要意义。 前人的研究显示，在不同黄瓜材料中，营养体苦味分别受bi 和bi-2 两对隐性基因的控制【8】。黄瓜营养器官苦味表现为独立遗传，不受控制果实苦味基因Bt的影响，但纯合基因型bibi对Bt存在隐性上位作用，当处于杂合状态Bibi时，无论Bt存在与否，果实都会出现苦味。寻找与营养体苦味基因紧密连锁的分子标记和苦味基因的精细定位对于无苦味黄瓜的育种工作将有很重要的意义【9】。 目前对于黄瓜遗传转化技术的研究以及Bi基因的表达和功能分析已经有一定的基础，但是高效遗传转化体系尚不完善，基因型间转化频率差别大，实验的重复性差[10,11]。因此，通过植物生物技术的方法，构建适宜的遗传转化体系，无疑对于营养体苦味基因Bi的研究有较强的借鉴作用。 植物基因转化是利用分子生物学和基因工程技术，采用基因克隆、遗传转化以及细胞组织培养技术将外源基因插入到受体植物的基因组，并使其在后代植株中得以表达，从而使受体获得新性状。1983年Fraley[12]、Herrera-Estrella[13]等创造出世界上首批转基因植物，标志着植物转基因时代的到来；Horsh 等[14]于1985年首创叶盘转化法，使得植物遗传转化过程大为简化。 综上，本次研究的主要目的和意义包括以下几个方面： （1）验证Bi基因在黄瓜中的功能，确定实验室克隆得到的Bi基因； （2）以目标黄瓜品系S06为对象，在前人的研究基础上对影响黄瓜遗传转化的多个因素进行条件优化，以期获得适应该品种的遗传转化的最优条件，为后续Bi基因研究打下基础。 课题研究内容： 本研究以实验室品种S06为试材，力求得出其转化所需最佳菌液浓度、最佳潮霉素浓度，并进行侵染液的优化，建立遗传转化体系和检测体系，获得转基因植株，并对转基因材料进行分子鉴定。 （1）不同菌液浓度筛选 挑取含pCAMBIA2301-gusA载体的农杆菌GV3101单克隆置于液体LB培养基中，置于摇床上，28℃、200r 过夜培养，当菌液浓度OD 达到0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8时，MS液体培