蛋白质相互作用精品课件.pptVIP

Two-Hybrid的优点： 是酵母细胞内的in vivo相互作用。 只需要cDNA，简单。 弱的相互作用也能检测到。 Two-Hybrid的缺点： 都是融合蛋白，万一融合出新的相互作用。 酵母的翻译后修饰不尽相同。尤其是蛋白质的调控性修饰。 自身激活报告基因。 都基因库的要求比较高，单向1/3是in frame 蛋白质毒性。 第三者Z插足介导的相互作用。 假阳性。 lacZ UAS DB X lacZ DB X Auto activation BD X Marker1 AD Y lacZ UAS AD Y lacZ AD Y Marker2 Phage display（噬菌体展示） Phage display（噬菌体展示） Phage display的最大优点是数量大 细胞：108~109 细菌：1010 Phage：1012 寻找受体的配体 7肽：8x1016 蛋白质-蛋白质直接相互作用 Co-immunoprecipitation and antigen-antibody interaction（免疫共沉淀和抗原抗体结合） Affinity interaction（亲和作用） Yeast two-hybrid and phage display（酵母双杂交和噬菌体展示） Surface Plasmon Resonance FRET Proteomic analy