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第六章食品中微生物数量的检
测技术与指示菌类
、食品中的菌数检测技术及其新进展
二、指示菌类
三、其他菌类数量的检测方法
第一节食品中的菌数检测方法及其新进展
、显微镜直接计数法
二、平皿菌落总数测定法
最近似数测定法
四、还原试验法
五、其它方法
食品的卫生要求
☆《中华人民共和国食品卫生法》第四条指出:“食
品应当无毒、无害,符合应当有的营养要求,具有
相应的色、香、味等感官性状”。
☆这一条就明确地规定了食品的卫生要求
检测食品中微生物数量的卫生学意义:
☆可作为食品被微生物污染程度的标志(或食品清洁
状态的标志)
☆预测食品贮存期限(保质期)
☆食品中细菌总数还能反映食品的新鲜程度、是否发
生变质。
冷理想情况
理想的检测方法是对所有食品都适用,并在短时间
内获得准确结果。
☆实际上:
至今还没有一种通用的方法能准确测出食品中的实
际活菌数,都有一定的误差、适用范围和优缺点。
一、显微镜直接计数法(DMC)
1、直接涂片计数法
(1)操作方法
将0.0lmL经适当稀释的样品均匀涂布于载玻片上的lcm2
面积的方格内,经干燥、固定、革兰氏染色后,用显微镜观
察计数。
在计数前先用物镜测微尺测出油镜视野的直径,再观察
计算10~15个视野的细菌总数,求出平均数。
菌数
10×B[个/g(mL]
3.14×r
r显微镜油镜视野的半径(mm)
B稀释倍数
革兰染色法
凃片:接种环,挑取菌落,生理盐水一滴,涂匀
热固定:通过火焰若干次
初染:结晶紫一滴,1min,水洗
媒染:碘液一滴,1min,水洗
脱色:95%乙醇,约30s
复染:复红一滴,30s
涂片
热固定
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