紫外可见分光光度法测定排放水部分指标-郭熠.pptx 38页

紫外可见分光光度法监控排放水各项指标;§1主要测试项目; 紫外可见光基础知识 紫外可见分光光度计仪器构造、原理、测试能力及适用范围 排放水测试项目的检测方法、原理及操作步骤 仪器的维护和保养;1. 紫外光，紫外辐射（ultraviolet light, ultraviolet radiation） 紫外光波长比可见光短，但比X射线长的电磁辐射。紫外光在电磁波谱中范围波长为10~400nm 紫外光被划分为A射线、B射线、C射线（简称UVA、UVB、UVC） 波长范围：UVA：400~315nm UVB：315~280nm UVC：280~190nm;紫外可见分光光度法又称紫外—可见分子吸收光谱法(Ultraviolet-Visible Molecular Absorption Spectrometry) 紫外—可见吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法 它可用于定性和定量测定大量的无机化合物和有机化合物 ; 各种化合物由于组成和结构上的不同都有各自特征的紫外—可见吸收光谱 通过吸收光谱的形状、波峰的位置及强度、波峰的数目等进行定性分析 ;TU-1810 紫外可见分光光度计 ;一、定性分析 （一）定性方法 紫外－可见分光光度法在无机定性分析中并未得到广泛的应用 利用紫外－可见分光光度法确定未知不饱和化合物结构的结构骨架时，一般有两种方法： 一是比较吸收光谱的曲线 二是用经验规则计算最大吸收波长，然后与实测值比较 ;二、定量分析 1.???? UV-VIS定量分析特性 灵敏度可达10-4~10-5mol·L-1，甚至可达10-6 ~10-7mol·L-1 准确度好，相对误差在1%-3%范围内，如果操作得当，则误差往往可减少到百分之零点几 操作容易、简单 ;2. 分析条件的选择 A．仪器测量条件 合适的吸光度范围（调节待测物浓度、选用适当厚度的吸收池等） 入射光波长和狭缝宽度 B．反应条件的选择 显色剂用量 溶液酸度的选择 显色反应时间、温度等;C．参比溶液的选择 溶剂参比 试剂参比 试样参比 平行操作溶液参比 D．干扰及消除方法 控制酸度 掩蔽剂 选择适当分析波长 分离 ? ;3．单组分定量方法 对单一物质的定量分析比较简单，一般选用工作曲线法和标准加入法进行定量分析 ;4.? 多组分定量方法;两个以上吸光组分的混合物，??据其吸收峰的相互干扰情况，选择适当分析方法 当两组分仅部分重叠时，可通过选择适当的入射光波长，按单一组分的方法测定 当两组分相互重叠严重时，不可能采用单纯的单波长分光光度法测定，只能采用多组分定量方法 随着测量组分的增多，实验结果的误差也将增大 ;双波长法测定混浊样品 在双波长法测定中，若将λ2设在试样的吸收峰上，λ1设在试样无特征吸收的波长上，此时λ1和λ2处的背景吸收应相等。显然，λ2上测得的是试样本身的吸收与背景吸收的总和，λ1测得的是背景吸收。因此用双波长法可以消除因试样混浊产生的背景吸收 ;双波长分光光度法的特点 可进行混浊试样的分析 通过适当的波长组合，可进行双组分或三组分混合物的同时测定 当λ1、λ2相差1-2nm时，使用双波长同时扫描，可记录一阶导数光谱 采用一波长固定，另一波长扫描，记录吸收光谱，可消除混浊背景的影响 采用双笔记录器，可记录溶液中发生的两种现象 ;三、 朗伯比耳定律(Lambert-Beer’s Law) 分子吸收光谱定量分析的基本定律 它指出：当一束单色光穿过透明介质时，光强度的降低同入射光的强度、吸收介质的厚度以及光路中吸光微粒的数目成正比;A=-lgT=lg(I0/I)=εbc A ：吸光度 T ：透射比（百分透射比%） I0：入射光辐射强度 I ：透射光辐射强度 b ：光通过试样的光程长度（cm） c ：分析物浓度（mol●L-1） ε:摩尔吸收系数（L●mol-1●cm-1） （摩尔吸光系数是有色化合物的重要特性。 ε 愈大，表示该物质对某波长的光吸收能力愈强，因而光度测定的灵敏度就越高。）;朗伯比耳定律的局限性（Limitations to Beer’s Law） ;四、紫外－可见分光光度计(UV-VIS Spectrophotometer );白炽光源 在可见和近红外光区的常用光源 钨灯的使用范围320~2500nm 碘钨灯与钨灯相比，碘钨灯具有更大的发射强度和更长的使用寿命，是近代分光光度计中广泛使用的光源? ;辐射能量与施加的外加电压有关，在可见光区，辐射的能量与工作电压的4次方成正比 光电流也与灯丝电压的n次方(n＞1)成正比 使用时必须严格控制灯丝电压，必要时