第5篇同位素分析技术.ppt

如果活化后生成两种以上的放射性核 素，在任意时刻测得的放射性强度是各种 放射线强度之和。即 用最小二乘法拟合或用剥谱法将混合 衰变曲线分解，以得到各个单个组分的衰 变曲线。 ) / 693 . 0 exp( ) 0 ( ) ( i i i i T t I t I ? ? 2 ）能谱法 测定活化样品的 ? 能谱，确定某一特征峰下 的总计数，则刻度转换矩阵可求得相应核素的 含量。该方法可进行多元素同时分析，准确度 较高，但因探测效率限制，灵敏度受到有影响。 3 ）特征射线寿命法 为以上两种方法的结合。即选一特征能量 峰，测量衰变曲线。 免疫分析类型（用途，分离及分析技术） 免疫测定 均相 （ Ab-Ag E 酶活性改变，与 Ag E 相区分） ( 不分离 F 与 B) 液相（ EIA) 非均相 标记抗原 类型 （ 分离 F 与 B) 固相（ ELISA) 标记抗体 光镜水平 免疫组化 电镜水平 酶标测定简便，使用范围较广，但因酶反应对环境条件敏感， 定量性较差。 非均相液相法 非均相固相法（固定抗原） Ag - Ab Ab Ab Ag Ag Ab Ab Ag Ag Ab Ag Ab 2 E 2 E Ab E E 2 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ? ? 比色 底物 比色 产物 底物 ?? ? ?? ? ? ? ? ? E 2 1 Ab Ab Ag 均相酶标抗原 显色） 酶无活性） ： ( P S ( Ag Ab Ag Ab Ag : Ab Ag E E ? ? ? 2) 化学发光免疫分析（ chemical luminescent immunoassay,CLIA ） 用某些发光物质标记抗原（抗体），当其被 氧化时，可被化学反应激发而发光，以其发光作为 检测信号的免疫测定法。 ? 直接化学发光物质标记法 标记物为吖啶脂，该类化合物结构上都有吖 啶环，在过氧化氢阴离子（ HO - 2 ) 作用下，形成电子 激发态中间体 N- 甲基吖啶酮，其退激是放出 ? =395nm,430nm 的光子。 ? 酶标化学发光分析 以过氧化酶作为标记，发光物质作为酶的 底物的免疫分析。 a. 氨基邻苯二甲酰肼类 如鲁米诺，异鲁米 诺，在酶和启动发光剂（ NaOH+H 2 O 2 ) 作用下发光。 b. 环 1 ， 2- 二氧乙烷衍生物 为磷酸脂酶设 计的底物，含金刚烷基，在碱性磷酸酶作用下 脱去磷酸根形成中间体，中间体自发性断裂的 同时发出光子。 ? 电化学发光免疫分析 标记物为三联吡啶钌 ([Ru(bpy) 3 ] 2 + ), 当用磁性微珠链接并吸附到电极表面诱使 电化学发光而作为检测信号的免疫分析法。 主要特点，在氧化剂 TPA 不断的到补充时， 发光可周而复始进行。 3) 时间分辨荧光免疫分析（ time resolved fluorescence,TRF) 以鳖合三价镧系元素铕（ Eu) 、铽（ Tb) 、 镝（ Dy) 、钐（ Sm) 为标记物标记抗原（抗体）， 利用其荧光延迟发射的特性，以与短寿命背景 荧光时间相区分的性质进行检测的免疫分析方 法。 分析光谱学性质 1) 激发光谱带较宽（ 300-500nm), 有利于增 强激发，提高信号强度； 2 ）发射谱带较窄 ( ? 10nm), 有利于排除干扰； 3)Stoke 位移较大（ 250-300nm), 有利 于与激发光相区分； 4 ）荧光寿命较长（ 60-900 ? S),Eu 3+ 为 714 ? S, 而一般生色团 1-100 ? S ，蛋白质 1-10 ? S ，所以延迟测量可消除背静干扰； 5 ）标记稳定，可保存 1-2 年。 LUMINO 准自动化学发光免疫分析仪器 中国与国际免疫诊断现状 中国 国际（欧美为主） 放射免疫法 （ＲＩＡ） ． 兴起于 20 世纪 70 年代，现仍普遍使 用于县级以上医院； ．产品处于衰退期； ．厂商试剂与仪器共同开发，试剂 基本系列化。 ． 兴起于 20 世纪 60 年代，现已基本退 出临床应用； ．产品生命周期已终结； ．厂商试剂和仪器共同开发，试剂 基本系列化。 酶联免疫法 （ＥＬＩＳＡ） ． 兴起于 20 世纪 80 年代，现普遍使用 于各级临床机构，为我国临床免疫 诊断的基本方法； ．产品处于成熟期； ．厂商试剂与仪器共同开发，试剂 尚未系列化。 ．兴起于 20 世纪 70 年代，现仍在临 床应用； ．产品处于衰退期； ．厂商试剂与仪器共同开发，试剂 基本系列化。 化学发光免疫 法（ＣＬＩＡ） ． 引入于 20 世纪 90 年代，现个别较大 医院开展个别项目； ．产品处于导入期或成长期； ．无厂商开发生产，完全依赖进口 ． 兴起于 20 世纪 80 年代，现已被临床 普