发酵工程 柠檬酸发酵生产.pptxVIP

柠檬酸发酵生产;柠檬酸简介;3、柠檬酸的生产 提取：1784年瑞典化学家Scheel首先从柠檬汁中分离得到柠檬酸结晶；1860年意大利开始用石灰乳从果汁中提取和生产柠檬酸；;发酵生产： 1916年美国科学家Currie等发现多种黑曲霉菌株能产生柠檬酸； 1923年美国Pfizer公司采用黑曲霉发酵法工业化生产柠檬酸； 1952年美国Miles公司首先采用深层发酵法生产柠檬酸，从而大大地推动了世界柠檬酸发酵工业的迅猛发展。;我国的生产情况;目前世界柠檬酸年产量近一百万吨，中国、美国、欧洲各国为主要生产国。 我国年产量达三十万吨，但我国的柠檬酸消费和应用方面远落后于发达国家，我国柠檬酸80%用于出口。 ;黑曲霉的柠檬酸生物合成途径 ;;产酸期葡萄糖主要通过EMP降解，对柠檬酸的发酵生产是非常重要的。 因为1mol葡萄糖经EMP降解可得到2 mol丙酮酸，再经脱羧和CO2固定后，使1 mol葡萄糖合成1 mol柠檬酸，这样可获得较高的糖酸转化率（以质量计，葡萄糖合成柠檬酸的理论转化率为106.7%，对一水柠檬酸的理论转化率为116.7%）。 ;黑曲霉中也存在TCA和乙醛酸循环的酶系，但在产酸阶段，这两个循环均被阻断或减弱。 合成柠檬酸所需的草酰乙酸必须由含三碳的羧酸来提供，经证实，在黑曲霉产柠檬酸阶段主要是通过丙酮酸羧化酶的催化作用，使丙酮酸固定CO2而形成草酰乙酸。 ;从葡萄糖合成柠檬酸的总反应式为： ;黑曲霉合成柠檬酸的调节 ;;柠檬酸发酵的生产菌种 ;但是，以石油、乙酸、乙醇等为原料时，似乎都是酵母才能作为柠檬酸的生产菌株，如解脂假丝酵母，热带假丝酵母等。 但酵母利用石油为原料生产柠檬酸无一例外伴随着产生相当数量的异柠檬酸。 ;2、高产柠檬酸菌株的特征 ;能抗微量金属元素，特别是抗Mn2+、Zn2+、Cu2+和Fe2+等金属离子； 在摇瓶和深层发酵时能产生大量细小的菌丝球； 具有旁系呼吸链活性，利用葡萄糖时不产生或少产生ATP。;3、柠檬酸产生菌的筛选 ;柠檬酸的发酵生产 ;2、柠檬酸的深层发酵法 ;1）深层发酵法的生产工艺流程 ;柠檬酸深层发酵一般都采用不锈钢机械搅拌通气发酵罐，大部分为50-100m3，目前已发展至250-400m3，国外的发酵罐为400-600m3。采用二挡搅拌，为了减少对丝状菌丝的剪切作用，多用箭叶式搅拌器。 ;2）发酵工艺;斜面种子培养。 斜面培养基为10-12Bx的麦芽汁或米曲汁，也可采用20%马铃薯煮出汁琼脂培养基。33-35℃培养4-5d，至斜面长满孢子即可。 ;麸曲制备。 用1000ml三角烧瓶装麸皮40g左右，麸皮选用较粗者为好，必要时应先用水洗涤除去淀粉。麸曲的含水量要合适，一般控制在60-65%左右，麸曲种子的培养温度约34℃，培养1d后要“敲瓶”一次，使之上下翻动。培养好的麸曲应仔细观察有无其它霉菌污染并抽样作摇瓶产酸测定，合格者在20℃以下温度保藏。 ;种子罐培养 种子罐体积一般为发酵罐的1/10，薯干浓度为16-20%，比发酵罐为浓度稀些，但需添加一定量的含氮物质，如硫酸铵、尿素或适量的麸皮等。种子罐培养温度34℃，培养时间16-24h，至略微产酸即可转入发酵罐中。 ;发酵 培养基投料浓度视淀粉含量而定，一般为含总糖13-15%。50-100m3罐的搅拌转速为90-110rpm。培养温度35℃。采用二级通风，前期（16-24h）低风量，以利于菌丝生长和糖化酶的作用，以后通风比显（1：0.1-0.15）(体积比)。发酵时间50-70h，产酸12－15%，糖酸转化率90－104%。 ;3、柠檬酸的固体发酵工艺 ;固体发酵工艺流程;4、液体表面发酵法生产柠檬酸 ;柠檬酸的提取工艺 ;1、发酵液的预处理 预处理是将发酵液加热至75－90℃，以杀死柠檬酸产生菌及其它杂菌，终止发酵作用，同时使发酵液中部分蛋白变性、絮凝、降低醪液黏度利于过滤。预处理加热时间不能太长，若破坏菌丝球则影响过滤。 ;2、过滤 我国采用薯干粗原料发酵生产柠檬酸，发酵液中除菌丝外，还含有大量的原料残渣，固形物较多，因此不宜采用各种离心或固液分离设备，目前常用的是各种板框压滤机和真空带式过滤机。 ;3、中和 柠檬酸与Ca2+作用生成柠檬酸钙。生石灰（CaO）、熟石灰、氯化钙、碳酸钙等均可作为中和剂，最常用的是碳酸钙。 ;在中和过程中并不是一次反应就形成Ca3(C6H5O7)2?4H2O； 而是随着反应液中Ca2+的增加使柠檬酸分子中3个羧基上的H＋逐步被取代， 因此反应中将形成CaH4(C6H5O7)2和CaH (C6H5O7)2?3H2O两种中间物。 ;3种柠檬酸钙在水中的溶解度差异很大，四水柠檬酸钙的溶解度最小，故中和时应投入足量的中和剂使所有的柠檬酸都形成四水的钙盐。 另一方面柠檬酸钙在不同温度下的溶解度差异也很大，