男科学实验室诊断进展PPT幻灯片.ppt

* 结 论 男性不育是最常见的而且可以鉴定的人类生育失败的原因之一。尽管对精子生理学和精子与配子相互作用的生物学过程的研究已取得很大进展，各种各样的检测方法层出不穷，但目前更多的工作应着重于确定那些预言精子特征十分准确、与配子受精能力密切相关的临床男科诊断实验，并应对这些实验的客观性进行评价，这些实验应简便、经济实用、并提供一致的结果，而且应对它们标准化。 * 谢 谢！ * * * * * * * * * * * * * * * 　　　室内质控和室间质控是保证不同实验室结果准确和可靠的重要措施之一。精子计数是男科实验室目前考虑较多的质控项目之一，目前最大的挑战来自精子计数方法学的标准化和监测。本研究显示，Cell-VU计数池的准确性和精确性均优于血球计数池和Makler计数池，与文献报道一致。而且，Cell-VU可一次性或反复多次使用，这在计数传染性较强的样本时将显示出独特的优势。 　　　因此，我们建议要建立一个标准的计数池操作系统用于所有实验室，从而为不同实验室的质量控制评价提供基础，最终提高所有实验室结果的准确性和可靠性。Cell-VU应是此标准计数池的最佳选择。 * 2.精子功能测定 （1）传统经典的“仓鼠卵穿刺实验” （2）精子-宫颈粘液穿透试验 （3）毛细管穿透试验 （4）低渗肿胀试验 （5）吖啶橙染色(荧光显微镜) （6）精子DNA完整性检测（流式细胞仪） * 精子DNA完整性检测亦称精子染色质结构分析， SCSA），是应用流式细胞仪检测精子功能的方法之一。精子发生过程中，鱼精蛋白逐步取代组蛋白与DNA结合。精子进入附睾后，鱼精蛋白的组成不再改变。但附睾中精子在逐步成熟的过程中，鱼精蛋白中大量的巯基(SH)不断被氧化成二硫键(S=S)，与DNA结合更加紧密，使DNA更具抗酸能力，维持了双链结构的稳定性。 精子DNA完整性检测（流式细胞仪） * 而染色质异常的精子，鱼精蛋白中多数巯基未被氧化，在酸的作用下易变性为单链DNA。根据这一原理，用酸处理精液样品，再行吖啶橙(AO)染色， AO可与双链DNA结合呈单体形式发出绿色荧光，与单链DNA结合呈聚合物形式发出红或黄色荧光。然后通过配有专用软件的流式细胞仪可进行数据处理得出SCSA参数。 精子DNA完整性检测（流式细胞仪） * 二、生精细胞检查与睾丸活检 1、生精细胞检查 精液中除成熟的精子外，亦可见未成熟的生精细胞，包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、早期和晚期精子细胞等 生精细胞检查方法： 染色法 荧光原位杂交 单克隆抗体免疫组化法 流式细胞术 * 2、睾丸活检 开放活检、细针穿刺、活检枪、高能多谱勒超声为基础的睾丸活检 70年代 FSH可用放免方法测定，FSH水平可以反映生精功能受损程度，睾丸活检范围逐渐缩小，其适应证仅限于睾丸体积正常、FSH水平正常或轻度增高的无精子症病人。 80年代，精浆生化指标的测定可排除阻塞性无精子症，睾丸活检范围更小。 近年来，随着显微外科的发展和显微受精技术的应用，从精液中分离一条精子即可使卵子受精达到生育目的。因此，需行睾丸活检的病例更是寥寥无几。 * 三、白细胞精子症的检测 精液白细胞数1×106/ml，可诊断为白细胞精子症 白细胞可通过吞噬作用、产生活性氧（ROS）、分泌一些细胞因子等途径使精子损伤。精液中粒细胞为产生ROS的主要细胞。