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- 2020-10-04 发布于北京
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药品分析仪器操作技术药品质量与安全专业教学资源库紫外可见分光光度计原理及操作胡家栋药品质量与安全专业教学资源库目录紫外-可见分光光度计仪器原理紫外-可见分光光度计结构及类型UV-Vis分光光度法的应用和分析条件的选择UV-Vis分光光度计的保养与故障处理波长200 400 800 3200(nm)g -X-射线紫外可见红外 微波无线电核磁共振真空紫外近红外 波长越短,能量越高原理原理1)分子吸收光谱的形成过程:运动的分子外层电子----吸收外来外来辐射----产生电子能级跃迁---分子吸收谱。2)由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收 光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。3)紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)。 朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。I× 100% 透射率 T% =I0入射光I0透射光 I光程长b朗伯-比耳定律一、透射率T%?朗伯-比耳定律 当入射光波长一定时,待测溶液的吸光度A与其浓度和液层厚度成正比,即k 为比例系数,与溶液性质、温度和入射波长有关。 ? 当浓度以 g/L 表示时,称 k 为吸光系数,以 a 表示,即 ? 当浓度以mol/L表示时,称 k 为摩尔吸光系数,以? 表示,即 ? 比a更常用。?越大,表示方法的灵敏度越高。?与波长有关,因此,? 常以??表示。UV示意图仪器结构紫外-可见分光光度计仪器由光源、单色器、吸收池、检测器和数据系统五部分组成。一、光源 对光源基本要求:足够光强、稳定、连续辐射且强度随波长变化小。1. 钨及碘钨灯:340~1500 nm,多用在可见光区;2. 氢灯和氘灯:160~375nm,多用在紫外区。二、单色器(Monochromator) 在UV-Vis光度计中,单色器通常置于吸收池的前面(可防止强光照射引起吸收池中一些物质的分解)仪器结构三、吸收池(Cell,Container): 用于盛放样品。可用石英或玻璃两种材料制作,前者适于紫外区和可见光区;后者只适于可见光区。有些透明有机玻璃亦可用作吸收池。四、检测器: 硅光电池、PMT、PDA五、数据系统 它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。现在一般的紫外可见分光光度计有计算机控制和主机单片机控制两种类型,功能基本类似。谢谢观看药品质量与安全专业教学资源库
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