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1 作为谷氨酸发酵工业原料的水解糖液,必须具备以下条件:
(1) 糖液中还原糖的含量要达到发酵用糖浓度的要求
(2) 糖液洁净,是杏黄色或黄绿色,有一定的透光度。水解糖液的透光度在一定程度上反映了糖液质量的高低。透光度低,常常是由于淀粉水解过程中发生的葡萄糖复合反应程度高,产生的色素等杂质多,或者由于糖液中的脱色条件控制不当所致。
(3) 糖液中不含糊精。糊精并不能被谷氨酸菌利用,它的存在使发酵过程泡沫增多,易于逃料,发酵难以控制,也容易引起杂菌污染。
(4) 糖液不能变质。这就要求水解糖液的放置时间不宜太长,以免长菌、发酵而降低糖液的营养成分或产生其他的抑制物,一般现做现用。
2 淀粉水解糖的制备方法比较
酸解法 (acid hydrolysis method)
酸解法又称酸糖化法。它是以酸 (无机酸或有机酸)为催化剂,在高温高压下将淀粉水解转化为葡萄糖的方法。
优点:
用酸解法生产葡萄糖,具有生产方便、设备要求简单、水解时间短、设备生产能力大等优点。
缺点:
水解作用是在高温、高压及一定酸度条件下进行的,因此,酸解法要求有耐腐蚀、耐高温、耐高压的设备。
淀粉在酸水解过程中研发生的化学变化是很复杂的,除了淀粉的水解反应外,尚有副反应的发生,这将造成葡萄糖的损失而使淀粉的转化率降低。
酸水解法对淀粉原料要求较严格,淀粉颗粒不宜过大,大小要均匀。颗粒大,易造成水解不透彻;淀粉乳浓度也不宜过高,浓度高,淀粉转化率低,这些是酸解法存在的待解决的问题。
酶解法 (enzyme hydrolysis method )
酶解法是用专一性很强的淀粉酶及糖化酶将淀粉水解为葡萄糖的工艺。
利用α-淀粉酶将淀粉液化转化为糊精及低聚糖,使淀粉的可溶性增加,这个过程称为液化(liquification)。
利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解转化为葡萄糖,这个过程在生产中称为糖化 (saccharification)。
淀粉的液化和糖化都是在酶的作用下进行的,故酶解法又有双酶 (或多酶)水解法之称 (double-enzyme hydrolysis method)。
优点:
(1) 采用酶法制备葡萄糖,酶解反应条件较温和。因此,不需耐高温、高压、耐酸的设备,便于就地取材,容易运作。
(2) 微生物酶作用的专一性强,淀粉水解的副反应少,因而水解糖液的纯度高,淀粉转化率(出糖率)高。
(3)可在较高淀粉乳浓度下水解,而且可采用粗原料。
(4)用酶解法制得的糖液颜色浅,较纯净,无异味,质量高,有利于糖液的充分利用。
缺点:
酶解反应时间较长 (48h),需要的设备较多,需要具有专门培养酶的条件,而且酶本身是蛋白质,易引起糖液过滤困难。
第二章 氨基酸的发酵机制
3 氨基酸合成的调节
起调节作用的是关键酶。
关键酶是参与代谢调节的酶的总称。作为一个反应的限速因子,对整个反应起限速作用。这些酶常位于代谢流的枢纽之处,对代谢流的质和都起着制约的作用。
一般情况下,与氨基酸生物合成途径分支点有关系的分支点酶可以成为关键酶,但关键酶并不都是分支点酶。关键酶的关键效果也只是在特定的氨基生物合成过程中成立,而在其它氨基酸的生物合成过程中则不成立。
在每个氨基酸的生物合成途径中,都有一种以上的关键酶。
生物合成的途径越长,关键的数目就越多。
关键酶中有的是变构酶,有的是同功酶,也有的是多功能酶。
对代谢流影最大的关键酶处于主导地位,常被配备在由同一前体物出发去生物合成多种氨基酸的关键点上。
另外,关键酶所受的反馈调节因菌株而异。
4 反馈控制与优先合成
氨基酸生物合成的基本调节机制有反馈控制 (反馈阻遏与反馈抑制)和在合成途径分支点处的优先合成。
图9-24所示的反馈控制,由催化合成途径最初反应A→B的初始酶受终产物氨基酸E的反馈抑制和合成途径上各种酶受终产物氨基酸E的反馈阻遏组成。
优先合成:
底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G,由于a酶的酶活性远远大于b酶的酶活性,结果优先合成E。E合成达到一定浓度时,就会抑制a酶,使代谢转向合成G。G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。
5 氨基酸合成的调节机制:
(1)通过控制有关基因表达的控制机制
诱导:促进酶的合成。
阻遏:抑制酶的合成,包括终产物阻遏、分解代谢物阻遏和弱化调节。
(2)通过酶活性的控制机制
终产物抑制或激活。
通过辅酶水平的活性调节。
酶原的活化。
潜在酶的活化。
(3)通过细胞膜渗透性的控制 如棒杆菌、短杆菌积累谷氨酸过程中的细胞膜渗透性变化。
第三章 谷氨酸的发酵机制
1 谷氨酸生物合成途径
谷氨酸的合成主要途径是α-酮戊二酸的还原性氨基化,是通过谷氨酸脱氢酶完成的。α-酮戊二酸是谷氨酸合成的直接前体,它来源于三羧酸循环,
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