专题四 现代食品检测技术在食品组分研究中的应用-完成.pdf.doc

化学工程与食品科学学院——现代食品检测技术 专题四 现代食品检测技术在 食品组分研究中的应用 授课人：郭 壮 邮箱：guozhuang1984@163.com 电话652237） 第一章 高效液相色谱技术（HPLC） 高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC） 第一节 问题的提出 食品中营养物质的测定 食物中氨基酸的种类和含量怎样分析？ 啤酒中有机酸分析 啤酒中含有大量的有机酸，具有清新、提神的作用。有 机酸种类及含量怎样分析？ 牛奶中的三聚氰胺含量分析 奶制品中三聚氰胺含量怎样测定？ 肉制品中防腐剂含量的测定 常用的防腐剂有苯甲酸及其钠盐，山梨酸及其钠盐等 ，其含量怎样分析？ 第二节 高效液相色谱技术 第二节 高效液相色谱技术 色谱技术的起源与发展 HPLC和GC的应用差异 内容 高效液相色谱的特点 高效液相色谱分析原理 高效液相色谱的保留机理 色谱的起源 (1903) Chromatography 色谱 M.S. Tswett（茨维特） 色谱法的定义 茨维特的实验 色谱分离效果图 色谱的定义 流动相 固定相  利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、 分配、吸附等化学作用性能的差异,当两相 作相对运动时,使各组分在两相中反复多次 受到上述各作用力而达到相互分离。 色谱分离 淋洗液 慢 中等 快 Temporal course 1952年，诺贝尔化学奖得主：A.J.P.马丁、R.L.M.辛格 Archer John Porter Martin（1910-2002）英国分析化学家 Richard Laurence Millington Synge（1914-1994）英国生物化学家 获奖项目：发明分配色谱法。 预言了GC的诞生。（1952年，发表了第一篇GC论文） 第二节 高效液相色谱技术 色谱技术的起源与发展 HPLC和GC的应用差异 内容 高效液相色谱的特点 高效液相色谱分析原理 高效液相色谱的保留机理 固定相和流动相 固定相：固定相是色谱的一个基质。它可以是固体物 质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液 体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基 质能与待分离的化合物进行可逆的吸附，溶解，交换 等作用。 流动相：在色谱过程中，推动固 定相上待分离的物质朝着一个方 向移动的液体、气体等，都称为 流动相。 气相和液相色谱 z气体为流动相的色谱称气相色谱（GC） z液体为流动相的色谱称液相色谱（LC） LC在生命科学研究中的应用远超过GC 生命体系完全是在以水作为溶剂, 绝大多数生物都是极 性很高的(溶解于水)。所以在生物分子的分析中GC的应用 很少，HPLC的应用很多。 HPLC 与 GC 的应用差异 HPLC GC 在常温下分析 在高温下，分析样品必须热稳定 样品必须溶于流动相 样品必须具有挥发性 固定相和流动相均参与分离 流动相只用来带动样品，不参加分离 分析样品无分子量限定 分析样品分子量一般小于 500amu HPLC 与 GC 的应用差异 亲水性 疏水性  氨基酸 无机离子 糖醇 挥发性羧酸 合成食用色素 糖 醛酮类 甘草膦 酶 苯酚 磺胺类 乙二醇 黄曲霉毒素 腈类 抗氧化剂 脂肪酸 抗生素 亚硝胺 有机磷 类黄酮 酒精 抗体 杀虫剂 天然食用色素 多环芳烃 糖类衍生物 芳族胺 脂溶性维生素 多氯联苯 环氧化 香精油 聚合物单体 甘油三酸酯 磷脂 合物 C2/C5 碳氢化合物 脂肪酸甲酯 芳香酯 挥发 非挥发 第二节 高效液相色谱技术 色谱技术的起源与发展 HPLC和GC的应用差异 内容 高效液相色谱的特点 高效液相色谱分析原理 高效液相色谱的保留机理 高效液相色谱的特点 高压：液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过 色谱柱，必须对流动相施加高压。 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达 1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液 相色谱法少得多，一般少于 1h 。 高效：颗粒极细（一般为10 mm以下）、规则均匀的固定 相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高。 高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器， 进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升。 第二节 高效液相色谱技术 色谱技术的起源与发展 HPLC和GC的应用差异 内容 高效液相色谱的特点 高效液相色谱分析原理 高效液相色谱的保留机理 分离的原理 z 样品组分在固定相和流动相之间的分配 流动相 流动相带动样品经过色谱柱，不同组 分与固定相之间相互作用的强度不同 不同组分在固定相上移动速度不同， 形成分离 z 分配系数 KD 固定相 ? Xm Xs KD1