大豆异黄酮对高脂肥胖大鼠结肠屏障功能的影响.pdfVIP

摘要 肥胖已成为威胁人类健康的重要疾病，而摄入过多高脂高糖食物是肥胖发生最常 见的原因。高脂饮食可诱导肠道氧化应激，降低黏蛋白和紧密连接蛋白含量，增加肠 道通透性，改变肠道菌群结构，增加血清中 LPS 含量并诱导炎症反应和肥胖相关代 谢性疾病。长期的高脂饮食主要诱导结肠炎症反应。大量研究认为维持肠道稳态能抑 制高脂饮食诱导的肥胖及其相关代谢性疾病的发生发展。大豆异黄酮具有抗氧化、降 血脂和减轻体重的作用，在体内的主要代谢方式是被结肠微生物降解。所以结肠可能 是大豆异黄酮作用的靶器官之一。因此，本文从氧化应激、黏膜免疫功能、肠道菌群 等方面探讨大豆异黄酮对高脂肥胖大鼠结肠黏膜屏障功能的影响及其作用机制，这可 为大豆异黄酮的应用提供新的思路，也为肥胖及其代谢性疾病的治疗提供理论依据。 本实验用高脂饲料喂养SD 大鼠9 周建立肥胖大鼠模型，再用不同剂量的大豆异 黄酮灌喂4 周。然后采集样本，分析大豆异黄酮对肥胖大鼠结肠组织学、肠道菌群、 氧化应激、肠道通透性、免疫功能和TLR4/NF-κB 信号通路的影响。主要结果如下： 1. 高脂饲料饲喂 9 周建立肥胖大鼠模型。补充大豆异黄酮可抑制肥胖大鼠体重 的增长，高剂量组显著降低血清中TC、LDL 含量 （P0.05 ）。 2. 各组大鼠结肠组织未见明显病理变化，但高脂组大鼠结肠中杯状细胞和淋巴 细胞数量均少于普通组（ P0.05 ）。高剂量组中杯状细胞和淋巴细胞数量增加（P0.05 ）， 而低剂量组中淋巴细胞数量增加 （P0.05 ）。 3. 分析各细胞因子含量发现：高脂组TNF-、IL-6、IL-17 和IL-18 mRNA 表达 量高于普通组（P0.05 ），而IL-10 表达量低于普通组（P0.05 ）。补充大豆异黄酮可 降低肥胖大鼠结肠中促炎因子TNF-、IL-4 、IL-6、IL-17 mRNA 表达量 （P0.05 ）， 增加抗炎因子IL-10 mRNA 表达量（P0.05 ）。高剂量组显著降低IL-18 mRNA 表达 量（P0.05 ）。在蛋白水平上，高脂组中TNF-蛋白含量增加而IL-10 含量减少（P0.05 ）。 补充大豆异黄酮显著减少 TNF-蛋白含量（P0.05 ），高剂量组显著增加 IL-10 含量 （P0.05 ）。这表明大豆异黄酮可通过减少促炎细胞因子含量和增加抗炎细胞因子含 量来改善高脂肥胖大鼠结肠免疫功能。 4. 分析结肠氧化应激相关指标可知：高脂组显著降低了T-AOC 、GSH-Px 、GSH、 SOD、CAT 活力 （P0.05 ），增加了MDA 和蛋白质羰基含量 （P0.05 ）。大豆异黄酮 可降低肥胖大鼠结肠中 MDA 和蛋白质羰基含量 （P0.05 ），高剂量组显著增加了 I T-AOC 、GSH-Px 、CAT 和 SOD 活力（P0.05 ）。这表明大豆异黄酮可通过增强肥胖 大鼠结肠中SOD、GSH-Px 、CAT 和T-AOC 活力来改善脂质和蛋白质的氧化损伤。 5. 在肠道通透性相关指标中，高脂组结肠中ZO-1、occludin、muc-2 mRNA 表达 量降低（P0.05 ），而血清中LPS 含量增加 （P0.05 ）。大豆异黄酮可增加肥胖大鼠结 肠中ZO-1 mRNA 表达量而减少LPS 含量 （P0.05 ），高剂量组显著增加了occludin 蛋白含量和muc-2 mRNA 表达量 （P0.05 ）。推测大豆异黄酮可降低肥胖大鼠结肠通 透性。 6. 探究盲肠菌群结构可知，高脂饮食可改变微生物区系，但大豆异黄酮对肥胖 大鼠盲肠微生物区系的影响不明显。在菌群数量上，大豆异黄酮可减少肥胖大鼠肠道 中硬壁菌门（Firmicutes ）数量，降低Firmicutes/ Bacteroidetes 比值，增加拟杆菌门 （Bacteroidetes ）和蛋白菌门（Proteobacteria ）数量。在属水平上，高脂组增加 Morganella 、Dorea 、Pasteurella 等有害菌含量。降低多种SCFAs 产生菌含量。大豆 异黄酮增加肥胖大鼠盲肠中Faecalibacterium 、Ruminococcaceae UCG-005 等 SCFAs 产生菌含量，减少多种有害菌含量。此外，