3型鸭肝炎病毒对鸭共刺激分子CD80_86的表达以及Th1_2型免疫反应的影响.pdfVIP

中文摘要 近年来，由3 型鸭肝炎病毒 （Duck hepatitis A virus ，DHAV-3 ）引起的鸭病毒性 肝炎（Duck viral hepatitis ，DVH ）在我国广泛流行，给养鸭业造成重大损失。在病毒 感染过程中，共刺激分子及Th1/2 型免疫反应参与机体的抗病毒进程并为机体提供免 疫保护。本文通过体外和体内试验研究 DHAV-3 对鸭共刺激分子 CD80/86 及其介导 的Th1/2 型免疫反应的影响，获得以下结果。 1．DHAV-3 对鸭体外培养细胞共刺激分子CD80/86 的表达和Th1/2 型免疫反应 的影响 用Poly （I :C ）刺激鸭外周血单个核细胞（PBMC ）后48h 和72h ，qRT-PCR 检测 到共刺激分子CD80/86 和Th1 型细胞因子IFNγ 与Th2 型细胞因子IL-4 转录水平的 上调；用CD80 和CD86 抗体分别阻断共刺激信号后发现，IFNγ 和IL-4 的转录水平 显著降低。表明鸭共刺激分子 CD80、CD86 参与 Th1/2 型免疫反应的激活。然后用 DHAV-3 感染PBMC ，qRT-PCR 和western-blot 方法检测到CD80、CD86 的转录和表 达水平显著上调，并且IFNγ 和IL-4 的转录水平48 h 显著上调。表明DHAV-3 可以 诱导CD80/86 的表达并激活Th1/2 型免疫反应。 2 ．DHAV-3 对雏鸭体内共刺激分子CD80/86 的表达和 Th1/2 型免疫反应的影响 分别用 DHAV-3 强弱毒感染雏鸭，qRT-PCR 和免疫组化检测到强毒感染鸭肝脏 内共刺激分子CD80、CD86 的表达以及Th1/2 型细胞因子的转录在感染早期即48 h 前虽有上调但上调水平较低，72~ 120 h 有明显的上调；脾脏中共刺激分子CD80、CD86 的表达在 36 h 有显著的上调并诱导Th1/2 型免疫反应；组织病理切片结果显示肝脏 和脾脏在24~48 h 的病变较严重，48 h 后病变逐渐减轻。而弱毒组雏鸭肝脏和脾脏中 共刺激分子CD80、CD86 的表达以及Th1/2 型细胞因子的转录在感染早期即48 h 前 已大量上调且除IFNγ 外的上调倍数比强毒组高，脾脏中IFNγ 的转录水平比强毒组 低；组织病理切片结果显示，弱毒组雏鸭肝脏和脾脏均未发现病变。 综上表明，鸭共刺激分子CD80/86 参与Th1/2 型免疫反应的激活，DHAV-3 可以 诱导体外PBMC 和鸭体内CD80/86 的表达并激活Th1/2 型免疫反应；DHAV-3 弱毒 诱导雏鸭肝脏中共刺激分子 CD80/86 和 Th1/2 型细胞因子上调水平比强毒高，这可 能是弱毒免疫鸭能够对机体产生免疫保护的原因。 关键词：3 型鸭肝炎病毒；共刺激分子；CD80 ；CD86 ；Th 1/2 型免疫反应 I Abstract In recent years, duck viral hepatitis (DVH) caused by duck hepatitis A virus (DHAV-3) is widely spread in China, causing huge losses for the breeding industry. During viral infection, costimulatory molecules and Th1/2 immune response participate in the antiviral process of the body and provide immune protection for the body. In this study, the effects of DHAV-3 on the costimulatory molecules CD80/86 and its mediated Th1/2 immune response in ducks were studied in vitro and in vivo, and the following results were obtained 1. Effects of DHAV-3 on t