基于代谢组学研究产前运动对围产期奶牛血浆代谢物影响.pdfVIP

摘 要 围产期的奶牛健康与繁殖能力、奶产量等密切相关，在此期间由于应激和自 身代谢压力导致代谢紊乱极易引起代谢性疾病的发生。运动作为一种安全可靠的 方式被用于许多代谢性疾病的辅助治疗中，具有调节自身免疫功能、内分泌及代 谢的作用。产前运动可以降低奶牛代谢紊乱性疾病的发病率，具有增加干物质采 食量、降低难产、加速胎衣排出等作用，但关于产前运动如何参与调节奶牛血浆 代谢物的机理尚不清楚。因此，为阐明产前运动对围产期奶牛代谢的影响，获取 运动对围产期奶牛代谢调节的动态信息，为提高奶牛围产期健康提供理论基础， 本研究开展以下试验： 试验一 选取年龄相似，体况评分、胎次和预产期相近的荷斯坦奶牛24 头， T C 12 T 随机分为试验组 （ 组）和对照组 （ 组），每组 头，统一饲养管理。 组于 预产期前21d 开始，每日9:00和16:00 时开放运动场，以不超过3km/h 的速度 运动，总运动量为4± 0.2km/d；C 组不做任何处理。在预产期前21d、7d、分 娩当天、产后7d 和产后30d （分别记为-21d、-7d、0d、+7d、+30d）晨饲前， T C 经尾静脉分别采集 组和 组奶牛血液，肝素钠抗凝离心收集血浆。检测血浆 NEFA BHBA Glu TG CHOL 中能量代谢相关指标 、 、 ，脂代谢相关指标 、 及蛋白 代谢相关指标CREA、UREA 水平。结果显示，T 组血浆NEFA、BHBA 与C 组 相比均呈现下降趋势 （0.05＜P ＜0.1），在-7 d 时T 组NEFA 浓度显著低于C 组 P 0.05 T Glu C 0d C （＜ ）； 组血浆 水平变化相较于 组更为平稳，在 显著低于 组 P 0.05 +30d C P 0.01 TG +30d C P （＜ ）， 极显著高于 组（＜ ）； 在 极显著高于 组 （ ＜0.01）；BUN、CREA 两组间无显著差异。结果表明，以低于3km/h 的速度进 行4±0.2km/d运动，可以降低围产期奶牛血浆NEFA 和BHBA 水平。 试验二 基于试验一结果，采用UHPLC-Q/TOF-MS非靶向代谢组学技术检 T C -7d 0d +7d +30d 测 组和 组围产期奶牛 、 、 和 的血浆代谢物，以多元统计分 析PCA、PLS-DA 和OPLS-DA 结合单变量分析t 检验筛选差异代谢物。结果显 示，在不同时间点共筛选出74 种显著差异代谢物，T 组与C 组相比，-7d 有45 28 15 0d 40 21 种差异代谢物，上调 种，下调 种； 有 种差异代谢物， 种上调， 19 +7d 29 12 17 +30d 43 种下调； 有 种差异代谢物，上调 种，下调 种； 有 种差 I 异代谢物，31种上调，12 种下调。这些差异代谢物包括氨基酸及其衍生物 （L- 亮氨酸、L-缬氨酸、L-苯丙氨酸、α-酮异戊酸等）、脂质 （油酸、棕榈酸、顺式 -9-棕榈油酸等）、维生素及其衍生物 （Vit D 、δ-生育酚、4 -磷酸吡哆胺酸等） 3 等，参与了包括氨基酸、脂代谢等在内的多条代谢通路调节。