滴鼻大肠杆菌致肥胖小鼠心脏组织病理损伤及细胞凋亡的研究.pdfVIP

中文摘要 心脏和肺脏在结构和功能上联系紧密，且细菌性肺炎常常与心脏不良事件有关。 肥胖与多种心血管疾病相关，同时提高机体对细菌感染的易感性。但是肥胖悖论提出 肥胖虽有多种不良影响，但有益于肺炎患者的生存并改善预后；且在非致死性大肠杆 菌 （Escherichia coli ）滴鼻感染状态下，肥胖小鼠肺脏的损伤、外周血T 淋巴细胞亚 群的改变以及脂代谢紊乱没有正常小鼠明显。目前肺部感染致心脏功能障碍已引起人 们大量关注，但关于滴鼻感染E. coli 对肥胖小鼠心脏组织病理损伤和细胞凋亡的研究 还未见报道。 本研究选用雄性ICR 小鼠，经8 周正常/高脂饮食诱导达标的Normal （正常）和 肥胖（DIO ）小鼠进行鼻内滴注PBS 或E. coli ，并分为4 组：Normal-PBS ，Normal-E. coli ，DIO-PBS 和 DIO-E. coli 。通过HE 和Masson 染色、ELISA 、生物化学法、流 式细胞术、Western blotting 技术和实时定量 PCR 分别测定滴鼻感染前 0h 和感染后 12h，24h 及72h 小鼠的体重、血清TG 和TC 含量，心脏组织形态变化、炎症和氧化 应激水平以及细胞凋亡率和线粒体凋亡相关蛋白及mRNA 表达水平。 体征和心脏组织损伤结果显示：DIO-PBS/ -E. coli 组小鼠体重、心脏质量、Lee’s p0.01 ）高于Normal-PBS/ -E. coli 组，而心 指数和血清中TG 和TC 含量皆极显著 （ 脏指数在DIO-PBS/ -E. coli 组虽有增加但无显著性差异（p0.05 ）。Normal- /DIO-E. coli 组心脏指数显著 （ p0.05 ）高于Normal- /DIO-PBS 组，然而心脏质量虽有增加但无 p0.05 ）。DIO-PBS/ -E. coli 组心脏体积和心腔皆增大，心肌间隙增宽， 显著性差异 （ 而E. coli 感染后无明显的宏观变化，但心肌细胞出现局部的空泡变性和胞浆溶解。 炎症水平检测结果显示：DIO-PBS/ -E. coli 组炎性因子和脂肪因子IL-6、IL-8、 Leptin 、Resistin 的含量均显著 （p0.05 ）高于Normal-PBS/ -E. coli 组；同时，相较 于Normal- /DIO-PBS 组，IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、Leptin 及Resistin 的表达水平 在E.coli 感染后的Normal- /DIO-E. coli 组的12h 和24h 皆显著提高 （p0.05 ）。 氧化应激状态检测结果显示：比较DIO-PBS 和Normal-PBS 组，DIO-PBS 组小 鼠心脏组织中GSH-Px 活性和GSH 含量显著增加（P0.05 ），而CAT，SOD 的活性 和 MDA 的含量虽增加但无显著性差异（p0.05 ）；同时，E. coli 感染后相比于Normal- I /DIO-PBS 组，Normal- /DIO-E. coli 组的上述氧化指标皆在 12h 或24h 显著(p0.05) 增加。 心脏细胞凋亡检测结果显示：相较于Normal-PBS 组，DIO-PBS/ -E. coli 组以及 Normal-E. coli 组心肌细胞凋亡率，caspase-3、caspase-9 和 bax mRNA 和蛋白以及 bax/bcl-2 比值皆极显著（P0.01 ）增加，而bcl-2 的mRNA 和蛋白水平极显著降低 P0.01 ）。 （ E. coli 滴鼻感染后，相较于DIO-E. coli 组小鼠，上述各参数（Leptin 和GSH 除 外）皆在Normal-E. coli 组的相对变化幅度更大，且在12h 或24h 变化达最大，随后 逐渐接近初始状况。 上述结果表明高脂饮食诱导的肥胖或E. coli 滴鼻感染在一定程度上