川芎内生细菌的分离鉴定及其促生研究.pdfVIP

摘要 植物内生细菌具有促进植物生长的作用、降低化肥使用量、减少土壤板结等优点， 可用于开发微生物肥料。本研究从采自四川省彭州市敖平镇的川芎Ligusticum chuanxiong Hort. 的根、茎、叶中分离出的内生细菌，通过 16SrDNA 序列分析，结 合形态特征和生理生化特征进行鉴定。通过溶圈法测定内生细菌溶解无机磷和钾的能 力、利用Ashby 培养基测定其固氮能力、利用铁细菌培养基测定其利用铁铵盐的能力、 利用Salkowski 比色法测定其IAA 的分泌量，初步筛选出具有促生潜力的内生细菌， 进而，通过盆栽试验研究供试菌株的促生能力。研究结果如下： 1. 采用研磨法分别从川芎根茎叶中分离出22 株内生细菌，其中根中分离出18 株，茎中分离出2 株，叶中分离出2 株。 2. 16SrDNA 22 通过 序列分析，结合形态特征和生理生化特征，对 株内生细菌 进行鉴定，这些菌株分属短杆菌属 （Brevibacterium）、芽孢杆菌属 （Bacillus）、类 芽孢杆菌属 （Paenibacillus）、甲烷杆菌属 （Methanobacterium）、芽孢八叠球菌属 （Sporosarcina）等5个不同的细菌属。其中芽孢杆菌属为优势菌属，占总分离菌株 的77.2%。 3. 测定了各菌株溶磷、溶钾、固氮、利用铁铵盐、产生IAA 的能力。结果表明， 22 株内生细菌中，有2 株内生细菌具有溶磷能力，有6株内生细菌具有固氮能力， 具有溶钾能力的0株，利用铁铵盐的菌株10株，12 株具有不同程度产生IAA 的能力。 4. 6 Lcl-2 Lcr-15 Lcr-16 Lcs-2 Lcr-17 选择 株促生潜力强的内生细菌 （ 、 、 、 、 、 Lcr-18），测定其在盆栽条件下对川芎的促生效应。结果显示，所有供试菌株对川芎 植株的生长均能产生不同程度的促进作用。其中，叶绿素b、可溶性糖、可溶性蛋白、 类胡萝 卜素、叶绿素总量、MDA、无机磷的含量，处理组与对照组相比，差异极显 a 著；株高、叶绿素 、硝态氮的含量，处理组与对照组相比，差异显著。通过数据分 析，发现菌株Lcs-2、Lcr-16、Lcr-18促进川芎生长的效果最为明显。 关键词：川芎；内生细菌；分离；鉴定；促生作用 I Abstract The endophytic bacteria living insideplants can promoteplant growth ,which can be used to develop microbial fertilizer, with the advantages promotion plant growth, reduce fertilizer use, and reduce soil compaction, etc. In this paper,Ligusticum chuanxiong Hort. were collected from Pengzhou, Sichuan province as materials, and the endophytic bacteria in roots, stems and leaves were isolated. According to the morphological, physiological and biochemical characteristics, as wellas anal-ysis of 16SrDNA sequences, identification of endophytic bacteria. Dissolution circle method was used to determine inorganic phosphorus and potassium dissolving ability; the Ashby medium method