新冠病毒核酸检测注意事项和生物安全要求.pdf

新冠病毒核酸检测注意事项 及生物安全要求 刘洋 南昌大学第一附属医 内容目录 新冠病毒核 新型冠状病毒 酸检测 生物学特性 新冠核酸检 实验室设置 测注意事项 与安全防护 新冠病毒生物学特性 冠状病毒：单股正链RNA病毒 229E α δ 夜莺冠状病毒 HKU11 NL63 鹅口疮冠状病毒 HKU12 OC43 β γ 鸡传染性支气管炎病毒IBV HKU1 白鲸冠状病毒SW1 MERS-CoV SARS-CoV SARS-CoV-2 感染人类冠状病毒 新冠病毒结构特性 S蛋白特异性识别血管紧张素转换酶2 （ Orf1a/b基因编码非结构蛋白RNA聚 ACE2 ），介导病毒-宿主细胞膜融合，利 合酶复合体 用宿主细胞进行5’端的Orf1a/b基因翻译， S定位于病毒颗粒表面的刺突糖蛋白 生成RNA聚合酶复合体，以病毒基因组生 E包膜蛋白、M 膜糖蛋白 N定位于冠状病毒内部的核衣壳蛋白 成负链，紧接着以负链生成基因组正链 RNA，实现病毒基因组复制。 新冠病毒基因组有29903bp， 3’端结构性及辅助性蛋白通过不连续转 为多顺反子结构，主要基因 录方式，产生5'负链亚基因组RNA （ 排列顺序为5'-Orf1a/b-S-E-M sgRNA ），合成3'套叠正链sgRNA，翻 -N-3'，包涵5'端甲基化帽子 译成蛋白。病毒组装，囊泡运至胞膜， 和 3' 端 Poly A 尾，与真核生 胞吐释放至胞外 物mRNA结构类似。 新冠病毒传染特性 01 S蛋白与ACE2结合进入细胞。 ACE2是新冠病毒初次感染的限制因子。 02 鼻腔杯状细胞和纤毛细胞ACE2表达水平最高 鼻拭子的病毒载量显著高于咽拭子 03SARS-CoV-2平衡解离常数 （Kd）是15nM 传染特性 SARS-CoVKd是325.8nM，亲和力相差10-20倍 04 在出现症状的头5天里，新冠病毒可在咽 部活跃