果胶合成中UDP-葡萄糖途径对棉花纤维发育的影响.pdfVIP

摘 要 果胶是棉纤维初生细胞壁中基本成分之一，并影响纤维和木质结构中的次生壁增厚。果胶 是通过UDP-α-D-半乳糖醛酸（UDP-α-D-galacturonic acid，UDP-GalA ）聚合形成的聚半乳糖醛 酸复合多糖。所以 UDP-GalA 是果胶合成的重要前体。目前发现其主要通过 D-半乳糖醛酸 （D-galacturonate ），肌醇（myo-inositol ）和UDP-葡萄糖（UDP-glucose ）途径进行生物合成。 通过代谢组数据发现，随着纤维的发育，各果胶前体核甘糖含量都呈现下降的趋势，具有 优异纤维品质的陆地棉品系 0-153 中的各果胶前体核甘糖的含量明显低于品质较差的品系 sGK9708，推测这些果胶前体核甘糖可能对棉花品质的形成起到重要的影响。通过对已有的转 录组数据重分析，筛选了参与果胶生物合成的基因家族成员并根据转录组数据观察基因表达水 平。在陆地棉中总共鉴定出52 个基因，并利用qRT-PCR 验证转录组数据真实性。为了进一步 筛选能够促进纤维伸长的物质，分别将不同的果胶前体核甘糖物质施加到胚珠培养基中，结果 发现UDP-葡萄糖醛酸（UDP-α-D glucuronic acid ，UDP-GlcA ）、UDP-葡萄糖（UDP-α-D-glucose， UDP-Glc ）对纤维伸长有明显促进作用，且促进相关基因的表达，而加入其它果胶核甘糖前体 物质对胚珠的生长表型无明显影响。UDP-Glc 和UDP-GlcA 是UDP-葡萄糖途径中两个关键前 体物质，推测UDP-葡萄糖途径可能在陆地棉果胶合成中起到重要的作用。 UDP-葡萄糖脱氢酶（UDP-glucose dehydrogenase，UGD ）是UDP-葡萄糖途径的起始酶， 对该途径可能起着重要的调节作用。对 UGD 基因家族进行生物信息学分析揭示了该基因家族 具有保守的基序和基因结构。结合转录组数据筛选出在纤维中优势表达基因 GhUGD10，对其 进行亚细胞定位发现GhUGD10 蛋白主要在细胞膜上表达。对 GhUGD10 基因构建拟南芥过表 达载体，结果发现与野生型相比，转基因株系的根明显增长，推测GhUGD10 促进了细胞伸长 或细胞数目增多，可能促进棉花纤维细胞突起和伸长，进而影响纤维品质。根据这些结果，推 测UDP-葡萄糖途径可能在陆地棉中的纤维发育中具有重要影响。 关键词：棉纤维，果胶，UDP-葡萄糖，UDP-葡萄糖脱氢酶 I Abstract Pectin has a fundamental role in primary cell walls, and affecting secondary wall thickening in fiber and woody structures. And the pectin is a polygalacturonic acid complex polysaccharide formed by polymerization of UDP-α-D-galacturonic acid (UDP-GalA). So the UDP-GalA is an important precursor for pectin synthesis, and it is biosynthesized through the D-galacturonate, myo-inositol, and UDP-glucose pathways. However, the detailed mechanism is still unclear in upland cotton (Gossypium hirsutum). Metabolomic data found that with the development of fiber, the content of each pectin precursor ribose showed a downward trend. The content of each pectin precursor ribos