花生种质资源白藜芦醇检测及高白藜芦醇种质筛选.pdfVIP

摘 要 花生（Arachis hypogaea L. ），又名“落花生”或 “长生果”，是一种营养丰富、食用广泛 的油料作物，在我国农业生产中占有重要地位。花生不仅含有大量的脂类、蛋白质和糖类，也含 有一些具有保健功能的营养成分，如维生素E、白藜芦醇、可溶性纤维等。白藜芦醇属于天然多 酚类化合物，具有显著的抗氧化活性，同时在预防癌症及心血管疾病、增强免疫力等方面有重要 作用。花生是除葡萄、虎杖外的少数含白藜芦醇的植物之一，选育高白藜芦醇花生新品种，研究 花生白藜芦醇积累及调控机制，是花生育种发展的重要方向。本研究以花生籽仁为对象，在其他 作物白藜芦醇检测方法的基础上，优化了花生籽仁白藜芦醇的提取及检测方法，并利用该方法对 404 份花生种质资源进行了多年多环境的白藜芦醇含量测定，明确了花生资源白藜芦醇含量的变 异，发掘出高白藜芦醇的特异种质。主要研究结果如下： 1、优化了花生籽仁白藜芦醇提取及检测方法。针对传统方法提取花生籽仁白藜芦醇提取率 低、提取时间长、提取物中容易混杂其他物质等问题，研究优化了花生籽仁白藜芦醇提取及检测 方法。利用酶解和超声处理相结合的方法提取花生籽仁白藜芦醇，确定最适酶浓度为 3 g/L、最 佳酶解时间为120 min，最佳超声时间为20 min 。与其他提取方法（乙醇浸提法）相比，提取效 率高约 11.8 倍。利用高效液相色谱检测，峰面积与样品浓度线性关系良好（R2 为 0.9991 ），稳 定性高（RSD 为0.95% ），回收率在83.66～120.68%范围内，检出限和定量限分别为0.006 μg/g 和0.051 μg/g。 2 、研究明确了花生种质资源白藜芦醇含量的变异。将404 份材料在2017 年武汉、2018 年武 汉、襄阳和湛江共四环境下种植，成熟收获晒干后检测花生籽仁白藜芦醇含量。404 份资源平均 白藜芦醇含量为0.525 μg/g，变异范围为0.106～1.711 μg/g，变异系数为40.8% 。从各个环境来看， 2017 年武汉环境下，404 份花生不同种质白藜芦醇平均含量为0.435 μg/g，变幅为0.106～1.177 μg/g，变异系数为46.5%，超过0.7 μg/g 的有42 份；2018 年武汉环境下，平均白藜芦醇含量为 0.568 μg/g，变幅为0.157～1.224 μg/g，变异系数为34.6%，超过0.7 μg/g 的有91 份；2018 年襄 阳环境下，平均白藜芦醇含量为0.591 μg/g，变幅为0.147～1.711 μg/g，变异系数为38.9%，超过 0.7 μg/g 的有100 份；2018 年湛江环境下，平均白藜芦醇含量为0.504 μg/g，变幅为0.165～1.350 μg/g，变异系数为37.9%，超过0.7 μg/g 的有53 份。 3、研究明确花生籽仁白藜芦醇含量受环境影响很大，从不同环境间筛选出高白藜芦醇含量 的种质7 份。从404 份花生资源在4 个环境下白藜芦醇含量的鉴定结果来看，2018 年武汉环境下 含量高于0.7 μg/g 的91 份资源，在2017 年武汉环境下只有20 份，在2018 年襄阳环境下只有39 份，2018 年湛江环境下只有30 份。综合分析4 个环境下的鉴定结果，发现Zh.h7788 、Zh.h1197 、 Zh.h8454 、Zh.h0602 、Zh.h0682 、Zh.h5874 和WH4280 等7 份种质材料的白藜芦醇含量较高，在 四个环境下白藜芦醇含量均大于0.7 μg/g。以上结果为花生高白藜芦醇品种选育提供了材料基础 和理论依据。 关键词：花生种质，白藜芦醇含量，检测方法 I Abstract Peanut (Arachis hypogaea L.), commonly known as groundnut or longevity nut, is a nutrient-rich and edible oil crop which has an important position in agricultural production in China.