棉花黄萎病菌株间病毒种类差异及生物防治潜力分析.pdfVIP

摘 要 棉花黄萎病（Verticillium wilt ）是典型的土传、维管束真菌病害，但该病害防治难度大， 故又被称为棉花上的“癌症”。防治棉花黄萎病的方法主要有选育抗病品种、化学防治、农 业防治和生物防治等措施，而利用生物防治方法防治棉花黄萎病越来越受到人们的关注。弱 毒相关真菌病毒的发现和应用为生物防治提供了有益补充，利用真菌病毒治疗板栗疫病和油 菜菌核病取得了成功。因此，从棉花黄萎病菌中筛选可引起致病力衰退的相关病毒，可望为 棉花黄萎病的生物防治提供新的病毒资源。 发现大丽轮枝菌强毒力菌株和低毒力菌株间携带病毒的种类存在明显差异。本研究以 10 株强致病力和弱致病力的单孢后代菌株为研究材料，在明确菌株致病力的基础上，分别 进行高通量宏病毒组测序，结果表明棉花黄萎病菌中携带丰富的病毒种类，多数为未曾报道 或分类地位不明确的病毒。10 株弱致病力菌株中总共携带42 种病毒，按核酸类型可分为正 单链RNA 病毒、负单链RNA 病毒、双链RNA 病毒及尚未进行分类的病毒；其中单链RNA 病毒占52%，dsRNA 病毒占 19%，未分类的病毒占29% 。强致病力菌株中总共携带1 种病 毒，为负单链RNA 病毒。通过两种不同致病力菌株所含病毒类型比较，发现菌株的致病力 与其携带的病毒数量具有正相关性。弱致病力菌株所携带的病毒种类及数量要明显比强致病 力菌株所携带的病毒种类丰富，数量多，即弱致病力菌株病毒种类丰富，强致病力菌株所携 带病毒种类少而单一。 发现低毒力菌株被病毒复合侵染，并对其携带病毒生防潜力进行了初步评估。通过对弱 致病力菌株中的病毒序列进行RT-PCR 验证，明确了各菌株中病毒种类，发现低毒力菌株中 均被多个病毒侵染，也发现一种病毒同时存在于多个菌株的现象。在弱致病力菌株中，隶属 于欧米尔病毒科的成员分布最多，而隶属于番茄丛矮病毒科的病毒最少。在发现的这些病毒 中，隶属于番茄丛矮病毒科、欧米尔病毒和线粒体病毒的病毒首次在棉花黄萎病菌中报道。 通过弱致病菌株与含潮霉素抗性的强致病力菌株对峙培养，将病毒传入强致病力菌株中，根 据传毒菌株的致病力测定结果，初步推断病毒能够在棉花黄萎病菌中通过菌丝融合而进行水 平传播，以及弱致病力菌株中的病毒传入强致病力菌株后，其致病力显著降低。 本研究通过利用高通量测序技术发现棉花黄萎病菌中存在大量的病毒，弱致病力菌株与 强致病力菌株中的病毒存在较大差异，弱致病力菌株中的病毒具有弱毒特性。该研究结果丰 富了真菌病毒种类，为研究病毒进化及利用真菌病毒防治棉花黄萎病提供了丰富的病毒资源。 关键词：棉花黄萎病菌，大丽轮枝菌，真菌病毒，病毒多样性，生物防治 I Abstract Cotton Verticillium wilt (Verticillium wilt) is a typical soil-borne and vascular fungal disease.Because of the difficulty of prevention, it is also called cancer on cotton.The main methods to control cotton Verticillium wilt are breeding resistant varieties, chemical control, agricultural control and biological control. Biological method to control Verticillium wilt has attracted lots of attention in recent years.The discovery and application of attenuated fungal viruses provided a useful supplement for biological control, and fungal viruses were successfully us