巴基斯坦J亚群和中国K亚群禽白血病病毒分子流行病学研究.pdfVIP

摘 要 禽白血病是由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus, ALV)引起的肿瘤性疾病的总称，主要包 括淋巴细胞性白血病、成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病等。目前，英美等发达国家经过多 年持续净化使得禽白血病得到了有效地控制，而大多数发展中国家禽白血病流行情况仍然严峻。 对于后者而言，进行ALV流行病学调查，掌握流行毒株分子特征、来源和流行趋势，对该病的有 效防控与净化至关重要。本研究首次从巴基斯坦分离到2株J亚群禽白血病病毒（ALV-J ），从中 国本地鸡群中分离到3株K亚群禽白血病病毒（ALV-K ），并系统的研究了ALV-J和ALV-K分子流 行病学及ALV-K致病性。 虽然巴基斯坦在2001年曾报道ALV感染病例，但是始终没有分离到ALV 。为掌握巴基斯坦 ALV流行毒株的分子流行病学特征及其可能的来源，本研究从巴基斯坦2个养鸡大省本地鸡的43 份病料中分离鉴定了2株ALV-J毒株（PK19FA01和PK19SA01 ），扩增获得了其全基因组序列并进 行了序列分析。结果发现两个分离株的变异主要集中在gp85、3’UTR和3’LTR区域。gp85基因序列 分析显示，PK19FA01与ALV-J原型毒株HPRS-103 （英国）同源性更高，而PK19SA01与美国ALV- J毒株更为相似。3’UTR和3’LTR序列分析的结果显示，2个分离株3’UTR的rTM 区均存在135 bp缺 失，都保留了完整的E元件，并且两个毒株E元件的同源性96% ；两者3’LTR 的U3 区同源性高达 98.7%。2株ALV-J 的3’UTR和3’LTR序列均与美国ALV-J毒株更为相似。这些结果表明巴基斯坦的 ALV流行毒株可能来源于美国或英国，然后在巴基斯坦的鸡群中可能又发生了重组。 2012年中国首次发现ALV-K毒株以来，该病毒已经在中国广泛流行，为进一步了解ALV-K 毒株遗传演化特征和致病性，本研究从采集的临床样品中分离到3个ALV-K毒株（JS15SG01 ， JS14LH01和JS13LH14 ），并扩增获得了3个毒株的全基因组序列。gp85氨基酸序列分析表明， JS14LH01和JS13LH14与中国ALV-K首个分离株JS11C1 的同源性高（95.2-99.1% ），属于同一分支； JS15SG01与JS11C1 的同源性仅为90%，而与日本神经胶质瘤病毒 （Km-5844、Sp-40等）同源性较 高，处于同一个分支。三个分离株的3’UTR区与ALV-E 的3’UTR 的同源性超过98%；JS15SG01 的 U3 区有11bp的缺失，其同源性与ALV-J 的同源性较高（90% ），而另外两个毒株（JS14LH01和 JS13LH14 ）的U3 区序列同源性更接近ALV-E （98% ）。这些序列特征表明，中国ALV-K流行株 出现了多个亚群重组的毒株，首次发现JS15SG01是ALV-K与ALV-E 以及ALV-J亚群重组毒株。接 下来本研究将JS15SG01分离株感染1 日龄SPF，对其致病性进行了研究。结果显示：JS15SG01感 染后第2周SPF鸡开始出现排毒，之后呈间歇性排毒；感染后第2周病毒血症阳性率达到100%，后 期呈间歇性；血清抗体在第12周开始转阳，19周阳性率达到38% 。致病性研究显示，在ALV-K感 染后，鸡只呈间歇性排毒和病毒血症而且不易产生特异性抗体。整个动物实验期内，感染组SPF I 鸡没有表现出临床症状。组织病理学结果表明，感染组SPF鸡的大脑和脾脏组织切片中出现巨噬 细胞大量增生。 本研究首次从巴基斯坦鸡群中分离到2株ALV-J毒株，获得了首个巴基斯坦ALV-J分离株的 全基因组序列，推测了可能的来源，丰富了巴基斯坦ALV 的流行病学数据，也有助于采取有效的 措施来预防和控制禽白血病的流行。另外，分离了3个ALV-K毒株，首次发现了ALV-K与ALV-E 以及ALV-J多个亚群重组的毒株，并评价了其致病性。这些结果为进一步了解ALV-K在中国的遗 传进化特点和致病特点奠定了基础。 关键词 ：禽白血病，K亚群禽白血病病毒，J亚群禽白血病病毒，遗传进化，致病性 II Abstract Avian