TSEG2，IZUMO1,SYCPS和LHB基因在牛睾丸不同发育阶段的表达特征.pdfVIP

摘要 本研究采用半定量PCR 、qPCR 和Western blot 方法从转录和翻译水平检测了TSEG2、 IZUMO1、SYCP3 和LHB 基因在不同发育期大通牦牛睾丸中表达规律，并利用免疫组织化学染色 法检测了TSEG2, IZUMO1、SYCP3和LHB蛋白在睾丸组织中的阳性信号分布位置。半定量和qPCR 结果表明，TSEG2, IZUMO1、SYCP3 和LHB 基因在睾丸组织中的表达量显著高于心脏、肝、肺 和脾等其他组织。免疫组化结果发现，随着年龄的增长，IZUMO 1、SYCP3 和LHB 蛋白表达量 逐渐上升，在6 岁时表达量达到最高。通过组织切片观察发现，曲细精管的横截面积、上皮厚度 和体积密度随着睾丸的发育逐渐增大，6 岁时牦牛睾丸中生精细胞及其细胞核的直径显著大于6 月龄和 18 月龄，而与30 月龄时无显著差异。上述研究结果表明TSEG2, IZUMO1, SYCP3 和LHB 基因对于牦牛的睾丸发育和繁殖能力具有重要影响。 关键词：大通牦牛；不同发育阶段；基因表达；TSEG ；IZUMO 1；SYCP3 II Content Abstract I 摘要II List of AbbreviationsVIII Chapter 1 1 1.1. Background Information1 1.2 Reproduction in the Male Yak 1 1.2.1 Testes2 1.2.2 Structures of Testis 3 1.2.3 Epididymis3 1.2.4 Spermatogenesis 4 1.3 Histology of Bull Reproductive System 6 1.4 Puberty and mating 6 1.5 Gene expression7 1.5.1 Transcription7 1.5.2 Translation 8 1.5.3 Regulation of genes 8 1.5.4 TSEG-2 8 1.5.5 Izumo sperm-egg fusion 1 (IZUMO1) 9 1.5.6 Synaptonemal complex protein 3 (SYCP3) 10 1.5.7 Luteinizing hormone beta polypeptide (LHB)11 1.6 Research obj ectives 13 III Chapter 214 2.1 Summary 14 2.2 Introduction14 2.3 Materials and methods 15 2.3.1 Study areas and body measurements 15 2.3.2 Extraction of RNA and synthesis of cDNA15 2.3.3 Designing of primers and bioinformatics analysis 16 2.3.4 Molecular Cloning 16 2.3.5 Semi quantitative PCR17 2.3.6 Quantitative RT-PCR 17 2.3.7 Exploration through histology and tunnel assay 17 2.3.8 Analysis through western blot 17 2.3.9 St