生物化学教学课件：RNA的生物合成.pptVIP

帽结构的意义： 可以使mRNA免遭核酸酶的攻击； 也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合，并参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA （二）3?-端加上多聚腺苷酸尾 尾部修饰是和转录终止同时进行的过程。 poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 poly A长度为100至200个核苷酸之间。 真核生物的编码基因是由几个编码区(外显子)和非编码区(内含子)相互间隔组成。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 （三）前体mRNA的剪接 外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子：断裂基因表达后，在剪接为成熟RNA过程中被除去的核酸序列。 mRNA剪接（mRNA splicing） 去除初级转录物上的内含子，把外显子连接为 成熟RNA的过程称为。 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 内含子5’-端与 snRNA中U1配对 内含子3’-端与 snRNA中U2配对 剪接过程（常见方式） snRNP与hnRNA结合成为剪接体 小分子核糖核蛋白 (RNP) 核小RNA (snRNA)： U1、2、4、5、6 UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1 E2 U1 U2 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 U1、U4、U5 ② 内含子弯曲成套索状，相邻的外显子相互靠拢； ③ U2与U6 形成催化中心 前体mRNA分子有剪切和剪接两种模式 剪切指的是剪去某些内含子后，在上游的外显子3?-端直接进行多聚腺苷酸化，不进行相邻外显子之间的连接反应。 剪接是指剪切后又将相邻的外显子片段连接起来，然后进行多聚腺苷酸化。 前体mRNA分子可发生可变剪接 许多前体mRNA分子经过加工只产生一种成熟的mRNA，翻译成相应的一种多肽；有些则可剪切或（和）剪接加工成结构有所不同的mRNA，这一现象称为可变剪接（alternative splicing），又称选择性剪接。 大鼠降钙素基因转录本的可变剪接 RNA编辑（RNA editing）：有些基因的蛋白质产物的氨基酸序列与基因的初级转录物序列并不完全对应，mRNA上的一些序列在转录后发生了改变。 （四）mRNA编辑 APOB基因的mRNA在肝和肠黏膜编码不同多肽链 二、真核rRNA转录后加工 转录 45S - rRNA 剪切 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 真核生物rRNA基因在染色体上呈串联基因单位重复排列。 三、真核生物tRNA转录后加工 1）切除5’-端前导序列和中部内含子 2） 3’-末端加上CCA-OH 3）修饰生成稀有碱基 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNAaseP、内切酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 四、RNA催化一些真核和原核基因内含子的自剪接 1982年美国Thomas Cech发现四膜虫的rRNA加工存在自我催化现象； 以后发现在tRNA 、mRNA(线粒体、叶绿体)加工时也存在自我剪接； 核酶：在自然界具有催化功能的RNA称为。 I和II型内含子的剪切 五、RNA在细胞内的降解有多种途径 正常转录物和异常转录物的降解途径有一定差异。 前者包括依赖于脱腺苷酸化的mRNA降解和不依赖于脱腺苷酸化的mRNA 降解； 后者包括无义介导的mRNA 降解、无终止降解、无停滞降解和核糖体延伸介导的降解等。 （一）依赖于脱腺苷酸 化的mRNA降解 （二）无义介导的mRNA降解 无义介导的mRNA降解：真核细胞mRNA的异常剪接可能会产生无义的终止密码子，由此产生的mRNA降解，是广泛存在的mRNA质量监控的重要机制。 含有提前终止密码子（premature translation