分子生物学-15-3-第八章真核基因表达调控-7-其他水平.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学内容与教学设计： 8.5.3 应答元件 能与某类专一蛋白因子结合，从而控制基因特异表达的DNA上游序列称为应答元件。 激素应答元件，简称HRE 热激应答元件（HSE） 金属应答元件（MRE） 8.5.1. 激素对靶基因的影响 许多类固醇激素（如雌激素、孕激素、醛固酮、糖皮质激素和雄激素）以及一般代谢性激素（如胰岛素）的调控作用都是通过起始基因转录而实现的。 1. 激素对靶基因的影响 体内存在的许多糖皮质类激素应答基因都有一段大约20bp的顺式作用元件（激素应答元件，简称HRE），该序列具有类似增强子的作用，其活性受激素制约。靶细胞中含有大量激素受体蛋白，而非靶细胞中没有或很少有这类受体。 激素 元件 序列 糖皮质 GRE TGGTACANNNTGTTCG 雌激素 ERE GGTCANNNTGTCC 甲状腺素 TRE CAGGGACGTGACCGCA 固醇类激素的受体蛋白分子有相同的结构框架， 激素结合区位于COOH端， DNA结合结构域常靠近NH2端 2. 热激蛋白诱导的基因表达 应答元件主要有： 热激应答元件（HSE） 糖皮质应答元件（GRE） 金属应答元件（MRE） 应答元件与细胞内专一的转录因子相互作用，协调相关基因的转录。 调控因子 应答元件 DNA序列 结合蛋白 热激 HSE CNNGAANNTCCNNG HSF 镉 MRE CGNCCCGGNCNC ？ 佛波酯 TRE TGACTCA AP1 血清 SRE CCATATTAGG SRF 热激蛋白：许多生物在最适温度范围以上，受热诱导合成的一系列蛋白（heat shock protein）。 其功能常与其他相关蛋白的折叠和去折叠有关， 具有分子伴侣的活性。 热激因子：一类应答于热激反应，结合热激应答元件的辅转录因子。 其功能是调节热激蛋白基因的表达。 举例： 受热后，果蝇细胞内Hsp70 mRNA水平提高1 000倍，是因为热激因子（heat shock factor，HSF）与hsp70基因TATA区上游60bp处的HSE相结合，诱发转录起始。 不受热或其他环境胁迫时，HSF主要以单体的形式存在于细胞质和核内。单体HSF没有DNA结合能力，Hsp70可能参与了维持HSF的单体形式。 受热激或其他环境胁迫时，细胞内变性蛋白增多，与HSF竞争结合Hsp70，从而释放HSF，使之形成三体并输入核内。HSF的三体能与HSE特异结合，促进基因转录。 HSF的这种能力可能还受磷酸化水平的影响。热激后，HSF不但形成三体，还会迅速被磷酸化。HSF与HSE的特异性结合，引起包括Hsp70在内的许多热激应答基因表达，大量产生Hsp70蛋白。随着热激温度消失，细胞内出现大量游离Hsp70蛋白，它们与HSF相结合，形成没有DNA结合能力的单体并脱离DNA。 8.6其它水平上的基因调控 1. RNA的加工成熟 各种基因的转录产物都是RNA，无论是rRNA、tRNA还是mRNA，初级转录的产物只有经过加工，才能成为有生物功能的活性分子。 1.1 rRNA和tRNA的加工成熟 rRNA加工有两个内容，一个是分子内的切割，另一个是化学修饰。真核生物的rRNA基因转录时先产生一个45S的前体rRNA，然后前体rRNA很快就会被加工降解，生成不同相对分子质量的成熟rRNA。rRNA的化学修饰主要是核糖甲基化。 tRNA基因转录时也可能先生成前体tRNA，tRNA基因的初级转录产物在进入细胞质后，首先经过核苷的修饰，生成4.5 S前体tRNA，再剪接成为成熟tRNA(4S)。 1.2 mRNA的加工成熟 编码蛋白质的基因转录产生mRNA。这类基因产物在转录后要进行一系列的加工变化，才能成为成熟的有生物功能的mRNA。 这些加工主要包括在mRNA的5末端加帽子，在其3末端加上poly(A)，进行RNA的剪接以及核苷酸的甲基化修饰等。由于mRNA的这些结构与它作为蛋白质合成模板的功能有密切关系，所以是基因表达的重要调控环节。 编码蛋白质的基因转录时首先生成前体pre-mRNA(或称核不均一RNA，hnRNA)，然后再加工剪接为成熟mRNA。 mRNA有效性的调控 真核生物能否长时间、及时地利用成熟的mRNA分子翻译出蛋白质以供生长、发育的需要，是与mRNA的稳定性以及屏蔽状态的解除密切相关的。 原核生物mRNA的半衰期很短，平均大约3min。高等真核生物迅速生长的细胞中mRNA的半衰期平均约为3h。在高度分化的