高级病理学：肿瘤的动物实验方法.pptVIP

　2、裸小鼠的胸腺 　　1968年 Pantelouris 发现裸鼠缺乏胸腺 　胸腺缺乏： 　　　　　　　失去特导结构 　　　　　　　（胸腺组织：皮质、髓质+胸腺小体） 　发育不全： 　　　　　　　 　　　　　　　显外分泌腺样结构 3、裸小鼠的免疫状态： （１）胸腺缺乏或发育不全 → 　　　淋巴结中胸腺依赖区的淋巴细胞缺如 　　　或消失 → 　　　不能形成成熟的淋巴细胞 → 　　　细胞免疫功能缺陷 （2） 有关B淋巴细胞的体液免疫以及 　　　非特异性免疫功能无降低或略增强 4、裸小鼠的喂养与死亡率： （1）Flanagan 观察在普通环境中多半在 　　2周内死亡，一般在25周内全部死亡（肝小叶坏死） （2）饲养在无特异病原体环境（Speciffic pathogen free, SPF）中，裸鼠才能长期存活并进行繁殖 （八）裸鼠在肿瘤实验研究中的应用 　　　1969年Rygard等第一次将人类肿瘤成功地移植到裸鼠身上，至后裸鼠已在肿瘤实验研究中得到广泛的应用。 裸鼠人癌移植的特性 1、有较高的移植成功率 1977年，日本国立癌中心下里幸雄等12个联合研究组移植人肿瘤共811例，初代移植成功有240例，恶性肿瘤初代移植成功率为31.3%，其种类几乎包括常见肿瘤。 1978年，美国Sloan—Kettering 癌症中心，108人癌进行407次裸鼠皮下接种，成功率为26.5%。 2、基本保持了人原发瘤的特性 （1）原发瘤病理形态特征： 　　裸鼠的移植瘤大多数基本保存了原发瘤的组织形态 肿瘤实质细胞——人癌（快） 　　　　　　　　　硬癌 → 髓样癌 间 　　质——裸鼠（慢） 　　　　　　　　　肝癌（条素状）→管腔样 （2）保持了原发瘤的特异蛋白，激素分泌及其它功能 肝癌、肝母细胞癌 → 甲胎蛋白 结肠癌、直肠癌 → 癌胚抗原 肾癌、肝癌 → 促红细胞生存因子。 绒毛膜上皮细胞癌 → HCG 部分胃癌 → 雌激素受体，铁传递蛋白受体 （3）染色体核型： 保持了人染色体核型——“X“型 （而裸鼠染色体核型——“Λ”型 ） （4）保持了人原发瘤的抗原性 （5）保持了人原发瘤对抗癌药的感受性 裸鼠移植在人癌研究中的应用 1、人癌的组织发生和细胞分化的研究。 （1）细胞形态发生的动态观察 （如，粘液癌的癌细胞形态发生） 单核细胞样癌细胞　　　　印戒样癌细胞 （2）有助于鉴定未分化肿瘤的组织学来源： 　　有人报道，裸鼠移植瘤经连续传代移植后的25%的肿瘤分化程度比原来增高，尤其是低分化及未分化肿瘤。 （3）再现瘤细胞株的原有组织类型： 　　体外培养人癌细胞移植在裸鼠，能完全再出现原肿瘤的组织结构，细胞形态。 2、人癌生化，酶学特性以及激毒分泌的研究 传代的移植瘤不仅能保持原来的形态结构特征，同时，也能保持原发瘤肿瘤细胞的机能。 已知肝癌 → 甲胎蛋白 移植瘤 → 甲胎蛋白，白蛋白，前白蛋白，转铁蛋白 在人休内证明这种蛋白的产生是困难的，但利用裸鼠移植做这方面的研究工作是完全可能的 大星等建立了一种胃原发的绒毛膜上皮细胞癌的裸鼠移植瘤株 这个瘤株→HCG，还可产生雌激素，孕酮和胎盘性催乳素，胎盘性碱性磷酸酶→患鼠性腺和乳腺呈现妊娠性变化（机能性肿瘤）（functioning tumor） 3、各种治疗方法的研究 （1）化学药物的筛选； （2）放射治疗的研究： 放疗后细胞动力学观察 放疗剂量（敏感性） （3）免疫治疗的研究： 卡介苗（BCG）与短小棒状杆菌（CP）→刺激免疫功能 BCG→对裸鼠的纤维内瘤无抑制作用 　（需依赖T-C） 但合并CP则有抑制作用 　（无需依赖T-C） （4）导向治疗的研究： 　　　　肿瘤（相关抗原） 特异结合　　　 　杀伤　　　　抗人肿瘤单克降抗体（载体、导弹） 　　　　 　　　　　　　放射核素、抗肿瘤药物（弹头） 裸鼠的肿瘤移植： 1、方法： （1）材料： a、新鲜瘤组织（游离1小时以内）锋利刀片切割 1-2mm3 b、癌块碎组织浸入培养液24h c、人癌细胞体外培养的细胞株 （2）部位： 体表 皮下背侧部，易于观察 腹腔种植，容易转移 原位移植，肝癌→肝内 胃癌→胃壁 2、存活率及其影响因素 （1）移植成功的判定： 肿瘤增大 病理证实 可传至别的裸鼠至少一次 （2）影响移植成功的因素 人癌的种类： 　　结直肠癌、肝癌、黑色素瘤，成功率度高 　　肝癌、胃癌较低 　　乳癌、淋巴瘤、白血病、骨髓瘤较难成功 接种的标本： 　　人癌细胞株移植较易成功 　　外科手术标本的组织块，成功率较低 接种技术： 鼠龄： 　　鼠龄小 8周龄以下，成活率高（20/22） 　　鼠龄大 9周龄以上，成活率低（22/40） 3、肿瘤生长的观察： 　潜伏期、生长曲线、倍增时间 肿瘤大小 长径╳ 短