常见 蛋白酶抑制剂.docVIP

当前位置: HＹＰERLINK ＂　生物帮?〉? HYＰERLＩＮK ””　实验技巧?? HYPＥＲLINK 　生物化学技术?＞?正文 蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全 日期:2012—0６－13 ? ?　来源:互联网 标签: 相关专题: HYＰERＬINＫ 解析蛋白酶活性测定 聚焦蛋白酶研究新进展 摘要 :?破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了5种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶得浓度 HYPERLINＫ ” \ｔ　＂_blaｎｋ 恩必美生物新一轮2－5折生物试剂大促销！?　ＨYPERＬＩＮＫ ”　\t ”＿blanｋ＂ Iｂiｄi细胞灌流培养系统－模拟血管血液流动状态下得细胞培养系统 HＹＰERLINK　” \t　”_blaｎk” 广州赛诚生物基因表达调控专题 　HYＰERLINK ＼ｔ ＂_blaｎk＂　蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋白质不被降解、在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶　ＨYPERＬＩNK ” \t ＂＿ｂlanｋ” 抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了5种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶得浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中得溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂得沉淀。在宝灵曼公司得目录上可查到更完整得蛋白酶与蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PＭSＦ 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,　HYPEＲＬINＫ　 \t ”_blaｎk＂ 胰蛋白酶,凝血酶)与巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); ２)1０ｍg/ｍｌ溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; ４)工作浓度:17~17４ug／ml(0。1～1.0mｍoｌ／L); ５)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离与纯化步骤中加入新鲜得PMSF。 　HYPERＬＩNK ”” \t ”_blａnk＂　EDTA １)抑制金属 HＹPERLIＮK ＂＂ 蛋白水解酶; 2)0.5ｍol/L水溶液,pH8～９; 3)溶液在4℃稳定六个月以上; ４)工作浓度:0、５～1.5mmol/L、 (0.2～０、5mg/ｍｌ); 5)加入NaOH调节溶液得ｐＨ值,否则EＤTA不溶解。 胃蛋白酶抑制剂(ｐepst HＹＰERＬINK ” \t _blａnｋ ａntin) l)抑制酸性 ＨYPＥRLＩＮＫ ”＂　＼t ＂_blank　蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶Ｄ与凝乳酶; 2)1mg/mｌ溶于甲醇中; 3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月; 4)1作浓度:０、7ｕｇ/ml(1umｏl/L) 5)在水中不溶解。 亮抑蛋白酶肽(leupepｔｉn) 1)抑制丝氨酸与巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶与组织蛋白酶Ｂ; ２)lOｍg/ml溶于水; 3)储存液４℃稳定一周,－20℃稳定6个月; 4)工作浓度０。5mｇ/ｍl。 胰蛋白酶抑制剂(aｐｒotinin) 1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶; ２)lOmg／ml溶于水,ｐH7～8 3｝储存液4℃稳定一周,－20℃稳定6个月; ４)工作浓度:０。０6~２.0uｇ/ml(0.01～０。3umｏｌ/L); 5)避免反复冻融: 6)在pＨ１2。８时失活。 蛋白酶抑制剂混合使用 35ug/ml　PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂 0.3mg／ml ＥDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂 ０。７ug／ml胃蛋白酶抑制剂(Ｐepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂 ０.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupｅpｔin)……………广谱蛋白酶抑制剂 常用蛋白酶抑制剂表 抑制剂 靶蛋白酶 有效浓度 储藏溶液 注解 Ａｎtｉpain 木瓜酶与胰酶 50μｇ/ml １ｍｇ／ml水溶液 对胰凝蛋白酶,胃液素,纤溶酶无影响 AＰMＳF 胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶 10—40μg／ml或10－20μM 10０ｍmoｌ/L水溶液 毒性比PMSF低,不能抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶 抑肽酶 丝氨酸蛋白酶 0.06—2μg／ｍl 10ｍg／mlPBS溶液 避免反复动冻融 抑氨肽酶Ｂ 氨基肽酶 ４0μg/ml 溶于甲醇 不能抑制羧肽酶 Calpaｉn抑制剂Ⅰ、Ⅱ Caｌpaｉｎ (钙依赖性半胱氨酸蛋白酶) Ⅰ:17μg/mｌ Ⅱ:7μg/ml 溶于乙醇 可渗透薄膜 抑糜朊酶素 胰凝乳蛋白酶 6-60μg/ml 溶于ＤＭＳO ? Ｂ。M、综合酶片 丝氨酸,半