第4章 体细胞变异.pptVIP

* 二、果树 我国有利用体细胞突变进行果树品种选育的传统。现在的许多果树主要栽培品种都是通过芽变选种得到的，像红富士苹果，纽荷尔脐橙，温州蜜柑等。 一般认为果树中体细胞无性系变异的频率为1%-3%，但也有在香蕉中表型变异率达90%的报道。 ?果树芽变是指多年生果树在生长过程中，芽的分生组织细胞受到外界因子的影响发生遗传物质的改变。芽变选种是人们在田间发现芽变后经选择、培育、鉴定而育成新品种。 * Shepard等（1980）对从叶肉的原生质体再生的1000个以上无性系进行分析，发现几乎找不出一个和原植株完全相同的无性系。 生长习性、成熟期、块茎的大小和整齐度、块茎颜色、光周期和产量均发生变异，还发现一些农艺性状优于原品种，如抗抗晚疫病等。 三、 马铃薯　 * 愈伤组织再生的无性系：表型和染色体数目的变异； 烟草的花粉植株：观察到的变异性状有产量、品质、开花期、株高、叶数、叶长、叶宽、生物碱含量和蔗糖含量等。 四、烟草 * 棉花组织培养植株再生过程中存在广泛的变异，出现在棉花组织培养植株再生的各个时期，变异涉及到棉花的各种性状，例如： 郭香墨等（1988）观察到在陆地棉的下胚轴愈伤组织悬浮系中四倍体细胞占多数（47.7%）；单倍体、二倍体、三倍体和六倍体分别占8.4%，27.8%，12.1%和2.0%；五倍体和少于13条染色体的细胞各占1%。 五、棉花　 * 六、水稻 通过粳稻体细胞无性系变异选出具广亲和性的水稻隐性高杆细胞突变体 从幼穗，花粉，成熟胚，种子诱导愈伤组织及原生质体出现大量的变异体：多倍体和非整倍体、矮化、粒重变异、白化、无分孽、抽穗期提前、育性、CMS不育系以及子粒产量变化等（孙立华，1994） 。 * 胡含等（1978；1980）获得的444个小麦花粉植株中，89.2%表现一致，是纯合二倍体；10.8%植株有分离，主要表现在个别性状上，可能是基因突变的结果。 Larkin等（1984）从未成熟胚得到数百株再生植株，观察后代的分离情况，发现了一系列形态学、生化和数量性状的变异，均可遗传到下一代。有些性状显然是单基因变异引起的，如芒的有无，褐色颖壳和籽粒颜色由红变白等。这些单基因突变既有隐性的，也有显性的。 七、小麦 * 由未成熟胚的愈伤组织再生的植株（SC1）中表现有节数、叶序和穗形的变异（Green，1977）。郑银洲等（1990）从不同来源的玉米纯系的幼雄穗组织培养获得了正常结实的再生植株，而其后代出现广泛的变异，这些变异包括分蘖、分枝、叶型、叶鞘颜色、粒型、粒色、穗型及生育期等，观察到ＳＣ３，有的变异稳定，有的仍在分离。 八、玉米 * 第五节 体细胞无性系变异的育种应用 体细胞无性系变异为作物改良、生化代谢途径研究，遗传操作选择标记，基因突变位点分析提供了研究资源 在品种改良中是一个变异广泛、稳定快、效率高的新途径 已成为细胞工程育种的重要组成部分： * 细胞工程育种流程图（引自：赵成章，1993） * 1 直接利用体细胞变异材料 Anu et al.(2004)研究了辣椒离体培养获得的再生植株的田间性状发现广泛的表型变异，有质量性状，也有数量性状变异，部分材料有育种利用价值。 * * 2 利用诱变技术或进行定向选择获得体细胞变异材料 体细胞在培养过程中会因多种因素影响产生变异，但为了增加突变频率，需要进行诱变处理。 对培养细胞用各种诱变剂处理,可以提高培养细胞突变率10～100 倍。烷化剂甲基磺酸乙醇( EMS) 是植物最有效的化学诱变剂之一,已成功地用于小麦、大豆 、花生等作物。 * 在培养过程中给予培养材料一定的选择压力，如盐类、病菌毒素、除草剂等，使非目标变异体在再培养过程中被淘汰，而符合人们要求的变异体得以保留和表现，起到定向培育作用。 在进行突变体筛选之前，首先应确定采用的抑制剂的浓度，即利用多大剂量的筛选剂较合适。 * 筛选压的确定（以悬浮培养为例） 根据上述计算结果作图，找出半致死剂量及使全部细胞均杀死的最低剂量。一般选择近于杀死全部细胞的剂量进行突变体筛选。 具体做法是： 每瓶接种一定重量的愈伤组织（如，0.25g），不同浓度抑制剂处理和对照均培养一定时期（如10d），然后收集细胞称重，并计算相对鲜重增长率： 鲜重增长率(%) =( Xn - X0)/ (Xc – X0) × 100 (Xn: 浓度为n的均重；Xc：对照均种；X0：接种量) * 采用正向选择法时可考虑两种选择方案，即一步筛选法和多步筛选法。 筛选材料：原生质体、愈伤块、悬浮培养物和花粉/