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。 生 理 实 验 设 计 实验课题：筒箭毒对神经 - 肌肉接头处的兴奋传递的影响 实验成员：星期五下午第四实验室第二组 精选资料，欢迎下载 。 筒箭毒对神经 - 肌肉接头处兴奋传递的影响 实验假设 筒箭毒能与乙酰胆碱竞争神经肌接头处的 nm受体，使肌肉松弛。 实验原理与目的 神经肌肉接头处的兴奋传递过程有三个重要的环节： 一是钙离子促进神经轴突中的囊泡膜与接头前膜发生融合而破裂； 二是囊泡中的乙酰胆碱释放到神经肌肉接头间隙； 三是乙酰胆碱与接头后膜上的受体结合，引发终板电位。 乙酰胆碱（ Acetylcholine,ACh ）是一种重要的神经递质，是连接每个运动神经元和骨骼肌 之间的信使。 如果 ACh 的传递受阻， 肌肉就不能收缩。 箭毒是美印第安人在猎箭头部涂抹的 一种毒药，它能够占用并阻塞 ACh 受体的位置，能竞争性阻断 ACh 的去极化作用致使神经 递质不能影响肌肉。能与 ACh 竞争神经肌接头处的 nm胆碱能受体，但不激动受体，因而使 骨骼肌松弛。 抗胆碱酯酶药可拮抗其肌肉松弛作用， 新斯的明是胆碱酯酶抑制剂， 可通过抑 制胆碱酯酶增减乙酰胆碱在肌接头间隙的浓度。 故筒箭毒过量可用适量新斯的明解救。 筒箭 毒与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体， 注射新斯的明后使突触间隙内的乙酰胆碱浓度升高 而使竞争性增强，故乙酰胆碱与受体接触增多，从而使肌无力症状减弱。 本实验的目的是探索筒箭毒对神经 -- 肌接头处兴奋传递的影响极其相关机制； 观察筒箭毒的 肌松作用，分析其作用点；了解新斯的明对抗筒箭毒的作用。 实验对象 大白鼠，体重 250g 以上 实验器材与药品 Powerlab 一套（主机，刺激器，张力换能器） ，手术器械一套，小动物人工呼吸机，气管插 管，棉线，大头针，铁架台，注射器 0.001g% 筒箭毒碱， 0.005g%新斯的明， 25%乌拉坦， 1.5%普鲁卡因，生理盐水 实验方法 1. 大鼠称重，麻醉； 25%乌拉坦腹腔注射 0.5ml/100g 麻醉。然后仰卧固定于鼠手术床上， 分离气管及颈外静脉， 分别插入气管插管和静脉插管， 准备好人工呼吸机。 数分钟后翻正反 射消失，即可进行实验； 2. 分离坐骨神经；在髋关节后，坐骨结节内凹陷处切开皮肤，钝性分离肌肉，暴露一段坐 骨神经，用浸有 1.5%普鲁卡因的棉线围绕坐骨神经打一个结，在坐骨神经干上做传导阻滞 麻醉，排除下行干扰； 3. 分离腓神经；在外侧剪开皮肤，钝性分离肌肉组织，分离腓神经，神经穿线备用； 4. 分离胫前肌； 将大鼠两前肢固定在手术台 （仰卧），从后置踝关节正前方向剪开小腿皮肤， 剪断踝关节前部韧带，分离胫前肌肌腱，沿胫骨分离胫前肌（注意不要损伤血管） ，在踝部 的胫前肌肌腱处扎线，与结扎线远端切断肌腱； 5. 安装并设定 powerlab 记录肌张力的 chart 设定文件； 调定刺肉毒碱对神经肌肉接头处处 兴奋传递的影响 6. 连接仪器； 手术操作完成后， 将胫前肌与 powerlab 的张力换能器向连接， 腓神经处安放