病理检验关键技术.docVIP

荧光原位杂交 FISH 用DNA探针和组织切片上互补DNA杂交，经过观察荧光信号在染色体上位置和颜色来反应对应基因情况 。 第一章 病理检验技术概述 病理学作用： 1、研究疾病病因、发病机制，认识 疾病发生发展规律 2、为临床诊疗疾病、诊疗疾病、分析预 后提供依据等。 病理检验定义： ------在临床医疗实践中，经过对患者病变组织或细胞进行检验，以帮助临床诊疗疾病方法称为病理检验。 一、病理检验关键任务 （一）确定疾病诊疗 （二）为临床选择诊疗方案提供依据 （三）提供相关预后原因信息。（最正确、最可靠、最终诊疗） （四）了解疾病发展及分析疗效 （五）为科学研究积累资料 （六）为提升临床诊疗水平服务 二、病理检验分类 （一）细胞学检验（脱落细胞、细针穿刺吸收） （二）组织学检验---最终诊疗 活体组织检验、手术标本检验、手术中病理检验 （三）尸体剖验 病理学技术： 在病理学临床及科学研究工作中使用多种技术方法统称为病理学技术。病理检验技术质量和水平是临床病理诊疗工作中至关关键原因。“技术是病理学之母。” 第二节、病理检验技术常规工作 收发工作 帮助取材和尸体剖检工作 制作制作切片及细胞学涂片 病理资料管理及检索 药品、物资管理及仪器维护 大致标本搜集和制作 第六章 组织制片技术 P39 常规石蜡切片制作程序 组织固定→取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→染色→封片→观察 第一节 组织块处理 （一）组织切片制作过程中多种操作： 1、取材和固定：合理取材、立即固定； 2、洗涤、脱水、透明； 4、浸蜡、包埋； 5、切片、贴片（展片、捞片）和染色： 6、封片：长久保留。 一、取材： -------根据病理检验目标和要求，切取合适大小和数量组织块，用于制作组织切片过程。 注意事项： 部位、大小、形状、方向 二、固定和固定液 固定：将组织浸入一些化学试剂，使组织细胞内物质尽可能保持在生活状态时形态结构和位置过程。 （一）固定目标： （1）预防组织、细胞自溶和腐败； （2）凝固或沉淀细胞内物质； （3）增加组织硬度，便于制片； （4）产生不一样折光率，有利于染色后观察识别。 （二）固 定 方 法： 1、浸泡固定法：病理外检通常均用此法； 2、注射、灌注法：体积过大或整个脏器或尸体固定； 3、微波固定法：应用于临床病理快速诊疗，微波固定组织温度至关关键。微波固定介质可用 生理盐水或10%甲醛。 4、蒸汽固定法：为了固定组织中可溶性物质、 血液、细胞涂片等； （三）固定液特征： 1、渗透力强，快速渗透组织内部 2、不会使组织过分收缩或膨胀 3、能硬化组织，保持细胞形态和位置 4、使组织对染料产生亲和力，产生折光率 （四）组织固定注意事项： 1、立即固定 2、固定容器宜大 3、固定液应足量：固定组织体积10-20倍 4、预防组织变形 5、确定合适固定时间 （五）组织固定液 常见固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）：配置为市售40%甲醛1份加水9份混合即成； 2、酒精（乙醇）：高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定； 3、中性缓冲甲醛液：可提升免疫组化阳性率。 4、酒精-甲醛液（A-F固定液）： 5、Zenker固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）： 久置能产生白色沉淀（三聚甲醛），轻易氧化变成甲酸，严重影响细胞核着色。 固定陈旧多血脏器如肝脾，易产生黑色色素，叫甲醛色素。 2、酒精（乙醇）： 高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定； 50%以上浓度乙醇可溶解脂肪和类脂质，也能够溶解血色素和损害其它色素。 中性甲醛液 配置：40%甲醛150-200ml，蒸馏水800-850ml，磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠13g。 常见固定液或标本保留液，是免疫组化最常见固定液。 选择性固定液： 1、丙酮：广泛用于组织化学中酶固定； 2、戊二醛固定液：广泛用于电镜标本固定，应采取缓冲液配制固定液 3、醋酸：不能保留糖，也不能固定脂肪及类脂，5%醋酸pH2～3可抑制细菌和酶活性； 4、苦味酸：强酸，易燃易爆，酒精溶液可固定糖类； 5、氯化汞：只宜固定薄片组织，2mm～3mm厚组织需固定6～18小时； 6、重铬酸钾：固定高尔基体、线粒体，对酸性染料着色良好； 7、锇酸：浓度为1%～2%水溶液用于电镜制片； 骨组织脱钙液： 在脱钙前，先将骨或钙化组织锯成4mm～5mm厚簿片，按常规充足固定，然后进行脱钙。 组织脱钙方法及应用： （一）酸性溶液脱钙： 1、脱钙液配制： （1）5%～10%硝酸水溶液：浓硝酸5ml～1